应激状态下大鼠结肠血红素氧合酶-2的表达.pdfVIP

维普资讯 围病理生理杂志 ChineseJournalotPathophvsiol 2006，77(II)． 二 · 2265 · [文章编号] 1000—4718(2006)11—2265—03 应激状态下大 鼠结肠血红素氧合酶 一2的表达 陆国明 ， 李玉梅 ， 章 明 ， 朱有法 (嘉兴学院医学院，浙江 嘉兴 314001；武警浙江省总队医院消化内科 ，浙江 嘉兴 314000；浙江大学 学院 解剖学教研室，病理学教研室，浙江 杭州 310031) [摘 要] 目的：探讨血红素氧合酶 一2(HO一2)在正常及应激状态下大 鼠结肠的表达及其意义 方法：将 30只sD大鼠随机分为对照组、应激组和应激 +ZnPP绀 ，采用水浸 一束缚应激 (WRS)动物模型，用免疫组织化学 SABC法检测HO一2在正常及应激后大鼠结肠中的表达，通过计算机图像分析系统进行定量测定 结果：对照组 大 鼠HO一2主要表达于结肠黏膜肌 、肠环行肌及黏膜下层的血管内皮和平滑肌 激组大鼠结肠的 HO一2免疫 阳性黏膜肌灰度值明显少于对照组 (P0．05)，环行肌阳性单位 (PU)明显高于对照组 (，’0．05)，在部分大肠腺 也有HO一2表达。应激 +ZnPP组结肠 HO一2免疫阳性黏膜肌灰度值明显高于麻激组 (P0．05)，环行肌 P【低 于应激组(P0．05)。结论：一氧化碳 (CO)是结肠重要的气体信号分子 ，可能参与心激状态下的结肠功能调节 [关键词] 应激；结肠；血红素氧合酶；免疫组织化学 ：KEYWORDS] Stress；Cohm；Hemeoxygenase；hnmunohistoehemistrv [中图分类号] R363 [文献标识码] A 各种躯体性 、心理性应激常导致肠道功能失调，表现为 2 动物分组及模型制作 肠道运动 、分泌和转运功能的改变，但其机制 尚不清楚。近 30只SD大鼠随机分成对照组、应激组和应激 +ZnPP 年来发现应激与某些肠道功能性疾病 (如肠 易激综合征， 组，每组 10只 实验前禁食 24h，禁水 1h。应激 +ZnPP组 irritablebowelsyndrome，IBS)的发生、发展密切相关 ，由于 大鼠在应激前30rain腹腔注射 ZnPP45Ixmol·kg一，对照纰 该类疾病具有较高的发生率，肠道缺乏形态学改变 ，Ⅱ目前 和应激组大 鼠均于实验前 30rain腹腔注射等体积生理盐水 尚无成熟的动物模型 ，因而为基础和临床科研工作者所重 将应激组和应激 +ZnPl~．绀大 鼠束缚于鼠板J并垂直 入 视：一氧化碳 (carbonmonoxide，CO)是继一氧化氮 (nitric (20±1)℃水浴中，水面与大鼠胸骨剑突同一水平，持续4h oxide，NO)后发现的新型气体信号分子和神经递质，内源性 对照组不施加应激 CO参与了对肠道平滑肌收缩的非。肾上腺素能lj乍胆碱能 (non 3 实验步骤 — adrenergicnon—chollnergic，NANC)神经调节 一本实验 大 鼠用 1％戊巴比妥钠 (30mg·kg )颈后皮下注射麻 采用 水 浸 一束缚应 激 (waterimmersion—restraintstress， 醉 。剖腹后剪取长度 为 1．0C1q／的结肠标本 (距 ljⅡ肠末端 WRS)动物模型，通过免疫组织化学方法，探讨 内源性 CO合 3clI11)：切开肠管后用生理盐水漂洗 ，放入 4％多聚甲醛溶液 成限速酶血红素氧合酶 一2(henieoxygenase一2，HO一2)在 同定，常规石蜡包埋后制作4txn)切片2张，其中 1张用 HE 正常大鼠结肠的表达及应激对其影 Ⅱ向，并为 IBS动物模型的 染色进行常规组织学榆查 ，另 1张用于免疫组织化学染色检 制作提供新的思路 测 HO一2的表达一 4 免疫组织化学染色 材 料