支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶的作用.pdfVIP

维普资讯 · l990· 生国疸理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(10)：1990—1995 [文章编号] 1000—4718(2007)10—1990—06 支气管哮喘豚 鼠肺组织中丝裂原活化蛋白 激酶对 一谷氨酰半胱氨酸合酶的作用 朱运福， 戴爱国 ， 胡瑞成 (湖南省老年医院，湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室 ，湖南 长沙410001) [摘 要] 目的：研究在支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对 一谷氨酰半胱 氨酸合酶(一GCS)的影响。方法：成年雄性豚鼠20只随机分成哮喘组和对照组，每组 l0只，以腹腔内注射联合 雾化吸入卵蛋白复制哮喘模型。测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数并进行分类计数；原位杂交和RT—PCR测 肺组织 中 ～GCS—hmRNA表达；免疫组化测 一GCS、磷酸化细胞外激活蛋白激酶 (P—ERK)、磷酸化c—Jun氨 基末端激酶(P—JNK)和磷酸化 p38(P—p38)在肺组织中的表达；Westernblotting测 P—ERK、P—JNK和P—p38 在肺组织中的表达；双酶法测 一GCS的活性。结果：(1)哮喘组 BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞明显多于对照 组 (P0．01)。(2)免疫组化显示肺组织中P—ERK、P—p38、P—JNK和 一GCS蛋白质表达哮喘组明显高于对照 组 (P0．01)；Westernblotting亦显示肺组织中P—ERK、P—JNK和P—p38蛋白质表达哮喘组均明显高于对照组。 (3)原位杂交和RT—PCR显示在肺组织中 一GCS—hmRNA表达哮喘组明显高于对照组 (P0．01)。(4) 一 GCS活性哮喘组明显高于对照组 (P0．01)。(5)直线相关性分析显示：在肺组织中P—ERK、P—p38与 一GCS—h mRNA、一GCS蛋白质呈显著正相关，P—JNK与 一GCS—hmRNA、一GCS蛋白质无明显相关性。结论：支气管哮 喘豚鼠肺中P—ERK、P—p38、P—JNK和 一GCS表达均增加 ；p—ERK和P—p38可能上调 一GCS表达。 [关键词] 哮喘；有丝分裂素激活蛋白激酶类；谷氨酰半胱氨酸合酶 [中图分类号] R562 [文献标识码] A Effectsofmitogen activatedprotein kinaseon —glutamylcysteine syn- thaseinlungofguineapigswithbronchialasthma ZHU Yun—fu，DAIAi—guo，HU Rui—cheng (DepartmentofRespiratoryMedicine，HunanInstituteofGerontology，HunanProvinceGeriatricHospital，Changsha 410001，China．E—mail：daiaiguo2003@ 163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofmitogenactivatedproteinkinaseon 一glutamylcysteinesyn— thase( 一GCS)inlungofguineapigswithbronchialasthma．METHODS：Twentyadultmaleugineapigsweredivided intoasthmaticgroupandcontrolrgoup (10ineachrgoup)．Asthmaticmodelwasestablishedbyovalbuminintraperitoneal injectioncombinedwithinhalation、Thenumbersoftotalandinflammationcellsinbronchoalveolarlavagefluid(BALF)