固定化乳酸酶膜圈地的研究.pdfVIP

维普资讯 第3卷 第3 山 东 科 Vo1．3No．3 1990年明 SHAN DONG SCIENCE Sept 109O 固定化乳酸酶膜圈的研究 冯德荣 冯云水 周万里 尚雪芹 张冬雁 (L东省生物研究所 ) 摘 要 本文研究了固定化L-乳酸氧化酶膜圈的制作技术及其生化特性 并与美 国YSI酶膜 圈 ’ 进行了比较 认为二者具有等值性，可-~YSI-23L型乳酸分析仪配套使用 ． l 。 关键词：L-乳酸氧化酶；回定化：酶膜圈 ．1 随着体育illl练科学化的发展，运动员的血乳酸指标已成为剐运动员机能评定 ，科学 训练、科学选材的重要依据之一 ．圈内外许多科技人员对血乳酸测定方法进行 了研 究，杨奎生等于1983年对超微量分析方面的研究结果进行了报道 。，Skinner于 1987 年报道了美 国 sI一23L型乳酸分析仪在游泳训练中的应用，并认为该仪器为唯一适 用 于体育训练的分析仪器 ．美 国YSI--23L型乳酸分析仪对血乳酸分析的关键 为 固定 化酶膜 圈，酶膜圈的研究工作Clark等于1970年 已进行 ，以后逐步改进，至 八 十 年 代才应用于仪器的配套使用．目前世界上的乳酸分析仪及酶膜圈生产技术均 由Yellow Springs仪器公司垄断．随着我国体育运动的不断发展，对仪器及酶膜圈需要量越来 越 大，再依赖进 口不但价格昂贵而且周期较长，因此乳酸分析用固定化酶膜圈的研究成为 科技人员的重要课题，本文就该课题进行了深入的研究． 1 材料及方法 1．1 材科与试剂 L一乳酸氧化酶 (西德BM公司) 戊二醛 (上海化学试剂采购供应站经销 、 乳酸仪试剂盒 (美国YSI公司) 质控血清 (卫生部上海生物制 品研究所 ) o”型圈 (自制 ) 醋酸纤维素膜 (自制 ) XHM膜片 (上海瑞丽分离仪器厂 ) 1．2 仪 器 YSI一23L型乳酸分析仪2台 (美YSI公司 )． 收稿 日期 ：l990-9I·t8 修盾 日期 ：t990-02-28 维普资讯 1990年 1．8 酶奠■的制馓力法 先将XHM膜片与 “o ”型圈粘接，在膜圈上 以戊=醛 为交联剂，固定一定量的L一 乳酸氧化酶，经老化处理，再在其上面固定一层醋酸纤维素膜 以增强酶膜 圈的抗 千 挠 性 ． 1．4 反应原理 L 乳酸氧化酶 L 乳酸 +o：— — Hzo4+丙酮酸 1．5 检测方法 将制好的酶膜圈 (SBA酶膜圈)装在YSI--23L型乳酸分析议 上，美 国YSI酶膜 圈 装在YSI-23L型乳酸分析仪上，以乳酸标准液、质控血清及全血 同时进行 测 试，每 次 ● 进样量为25~t1． ●