土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组研究.pdfVIP

blot)分析和 表达产物经十二烷基磺酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE)、蛋白质印迹(Western 鉴定。本研究结果显示人源华支睾吸虫GSTs编码区含有639个碱基，编码212个氨基酸残基；表 达的蛋白存在于上清中，大小约为42．68ku，可被感染华支睾吸虫人的阳性血清识别，证明GSTs基 因可在原核表达系统中高效表达并具有反应原性。 基金项目：十一五国家科技支撑计划项目(2010BAD04801．2)；国家质检总局科技计划项目 通讯作者：宋铭忻，e-mail：songmx@neau．edu．g：U 肝片吸虫囊蚴感染小鼠后AAMO中脂肪滴 及其相关蛋白的定位与分布 罗洪林”王豪举1谌剑波1周容琼2周作勇2张文韬1郭智莉1周雪梅1 (1．西南大学动物科技学院预防兽医学重庆市重点建设实验室．重庆北碚400716；2．西南 大学荣昌校区动物医学系．重庆荣s402460) 摘要：目的阐明肝片吸虫感染小鼠后选择性巨噬细胞(AAMO)中脂肪滴及其相关蛋白的定 位与分布，为后续研究AAMO的功能奠定基础。方法以肝片吸虫囊蚴为感染源，经口分别感 细胞，并设立人工巯基醋酸盐诱导巨噬细胞对照组进行体外培养。用荧光定量PCR检测AAMO 的标记蛋白RelIll专和Yml以确定其激活状态。采用特异性抗体对所获取的巨噬细胞细胞质染 色后用共聚焦显微镜摄取不同时间点从不同小鼠体内获取的巨噬细胞染色后的图片，并记录其荧光 强度。结果Relm岭和Yml基因在IL4R岭基因敲除小鼠和巯基醋酸盐诱导小鼠巨噬细胞中均表 达，但在IL4RO基因敲除小鼠表达的量显著下降。脂肪滴分布在TeM岛和FeM‰的细胞质中， 被染色成绿色且呈圆形。同时发现脂肪滴分布形式多样，大小不一，既有单个分布也能成蔟分布。 Te M岛细胞中的脂肪滴阳性率比野生型BALB／c中的显著增加，但FeM岛 IIAR岭基因敲除BALB／c 细胞中的脂肪滴阳性率却比野生型BALB／c中显著下降。围脂蛋白A的分布模式和荧光强度在TeM翰 和FeM‰中无显著差异。脂肪分化相关蛋白的荧光强度在IL-4Ra基因敲除小鼠FeM％中有所增强， 而在TeM鸟无显著差异。结论肝片吸虫囊蚴感染可诱导机体产生AAMO，这种AAMO的脂肪 滴分布形式多样，其中的围脂蛋白A与脂肪滴呈非共同相连形式分布在细胞质中，而脂肪分化相 关蛋白均位于脂肪滴的表面。 Fundamental 基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金(XDJ资助(supportedbythe Research FundsfortheCentralUniversities“)。 通讯作者：罗洪林(1977-)，男，四川遂宁人，副教授，获英国爱丁堡大学生物医学博士学位，主要从事感染与免疫 研究。Emaii：LHL200296@yahoo．gn．传真：023 土耳其斯坦东毕吸虫线粒体全基因组的研究 王宇，高俊峰，王春仁 (黑龙江八一农垦大学．黑龙江大庆，163319) m砘鳍纽咒配“，，1)隶属于扁形动物门，吸虫纲，复殖目， 摘要：土耳其斯坦东毕吸虫(Orientobilharzia 泛，常呈地方性流行，给畜牧业生产造成很大的经济损失。过去对土耳其斯坦东毕吸虫的研究主要 集中在形态学、生活史以及东毕吸虫病的流行病学调查、疾病的诊断和防治等方面，近年又利用线 粒体和核糖体部分基因进行了土耳其斯坦东毕吸虫分子种系发生的研究，但关于土耳其斯坦东毕吸 虫线粒体全基因组的研究尚未见报道。线粒体DNA是后生动物胞核外的遗传物质，其具有结构简单、 进化速度快、母性遗传等特点，是研究寄生虫分子分类、系统进化、推导进化年限的一种很好的分 子标记。本研究以土耳其斯坦东毕吸虫为研究对象，利用分子生物学方法，获得了虫体线粒体全基 因组，并分析基因组的组成、各基因顺序、编码使用模型、起始终止密码子、tRNA编码基因的二