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754蠕》2010年学术年会
裂谷热病毒样颗粒研制及荧光RT-PCR方法的建立
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裂谷热(RVF)是严重的外来人兽菇患病，国内外学者进行了相关的检测技术研究。但裂谷热病毒
RNA)技术，制各的病毒样颗粒稳定．安全，并能有效监控RNA样品核
人提出了装甲RNA(Armored
酸制各及后续核酸扩增反应的全过程。为了有敬防控裂谷热跨境传入，本研究在建立RVF实时荧光
R1二PcR检测方法的基础上，进行了裂谷热病毒样颗粒研制。
本研究针对RVFVs基因保守区域设计了特异性引物和探针，建立了荧光PCR方法，检测敏感性可
化及盐沉淀后纯化病毒样颗粒，对其进行特性鉴定，经试验表明，病毒样颗粒具有酎RNase的特性，稳
定性良好．在56C情况下至少可以保存1天；37C情况下至少可以保存20无：常温条件下至少可以保存
30天，4℃吼下温度可以保存更长时间：经电镜观察，能看到直径大约为26衄的多边形颗粒，即诱导表
谷热病毒样颗粒10倍倍比稀释，进行实时荧光敏感性检测，最低检测限可达425×1酽拷贝，可以满足
口岸裂谷热的检测、监测需求。
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讨论
的优势如下；①在安全方面．此病毒样颗粒无传染性，不会对实验人员和环境造成危害，②此病毒样颗
粒与大多RNA病毒结构相似，均为蛋白．RNA复台体，即都是蛋白外壳包裹核酸，能与其它病毒材料一
起经历核酸提取．反转录，PCR扩增，对RNA病毒的检测达到全程监控的效果，@避免出现假阴性结果。
nj以保存更长时间，
④此病毒样颗粒具有耐RNase的特性，稳定性良好，在室温可以保存至少30天．4C
从而解决fP．NA质控品使用、保存和运输的稳定性问题。同时．以此病毒样颗粒为材料建立的相关荧
光RT-PCR方法特异性强，敏感性高，可以满足实际检测应用。
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