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通塞脉片对实验性糖尿病足模型大鼠的作用研究 　　[摘要] 目的：观察通塞脉片（TSM）对糖尿病足（DF）模型大鼠足部创伤的治疗作用，并探讨其可能的作用机制。方法：清洁级雄性SD大鼠，除10只作空白对照组外，其他大鼠成功复制糖尿病足溃疡模型，随机分为模型组，二甲双胍组，TSM高、中、低剂量组（12.44，6.22，3.11 g?kg-1）。分别于给药第1，4，8，13，18天对大鼠进行溃疡创面拍照观察伤口愈合情况，治疗18 d后对足溃疡组织进行病理组织学检查，羟胺法和TBA法检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量，放射免疫法检测血清白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量，免疫组织化学法观察大鼠创面组织中VEGF的表达和毛细血管数。结果：TSM可以改善糖尿病足大鼠的病理形态学改变，加速4，8，13，18 d各时相点伤口愈合，降低第18天（修复后期）大鼠血清中MDA，IL-6，TNF-α的含量，升高SOD含量，其中TSM高剂量组与模型组比较差异具有显著性（P0.05，P0.01）；治疗后18 d（修复后期）TSM高、中剂量组VEGF的表达，TSM高剂量组毛细血管的数目明显低于模型组（P0.05，P0.01）。结论：TSM可以促进DF模型大鼠足部伤口愈合，降低血清中MDA，IL-6，TNF-α的含量，升高SOD含量，减少修复后期VEGF表达和毛细血管数量，其作用机制可能与抑制氧化应激损伤及炎性细胞浸润有关。 　　[关键词] 通塞脉片；糖尿病足；氧化应激；促炎因子；VEGF 　　[收稿日期] 2013-12-28 　　[基金项目] 江苏省科技厅社会发展项目（BE2011846） 　　[通信作者] 卞慧敏，教授，从事中药心血管药理学的研究，E-mail： hmbian@ 　　[作者简介] 郭静，硕士研究生， E-mail：gjing21@ 　　糖尿病足（DF）属于中医学的“消渴”、“脱疽”范畴，临床又称为糖尿病性肢端坏疽、糖尿病性动脉闭塞症，是常见的糖尿病慢性并发症[1]。通塞脉（TSM）由当归、牛膝、黄芪、党参等8味中药组成，在其药理、毒理实验及临床等方面已经做了大量研究，取得了一定成果，证实其对血栓闭塞性脉管炎有较好疗效[2]。DF的发病机制与脉管炎存在某些相近之处，二者均是由中小动脉狭窄、闭塞导致肢端失去营养而出现溃疡、坏死的血管性疾病，中医学将DF和脉管炎统归于“脱疽”范畴，表现为血瘀、湿热、热毒证。课题组前期的研究也证实TSM不仅能够降脂、抑制炎症反应，同时还可以通过促进血管新生改善肢体的缺血症状[3]，但是TSM对DF的实验研究还尚未见报道，基于以上认识作者开展了TSM对DF的实验研究，旨在为临床用药提供实验依据。 　　1 材料 　　1.1 动物 清洁级SD雄性大鼠，购自上海斯莱克公司，体重（200±20） g，生产合格证号SCXK（沪）2012-0002，饲养于南京中医药大学实验动物中心，使用许可证号SYXK（苏）2010-0006，单笼饲养，恒温（22±2） ℃，自由饮水，环境安静。高脂饲料配方：10%猪油，20%糖，2.5%蛋黄，67.5%基础饲料[4]。 　　1.2 试剂和仪器 通塞脉片浸膏（南星药业有限公司，生药3.25 g?g-1，批号120731）；二甲双胍（上海衡山药业有限公司，规格0.5 g/片，批号120712）；链脲佐菌素（STZ，Sigma 公司）；柠檬酸（北京化工厂，批；柠檬酸钠（北京化工厂，批；葡萄糖试剂盒（上海荣盛生物药业有限公司，批号2011001）；MDA试剂盒（南京建成生物工程研究所，批；SOD试剂盒（南京建成生物工程研究所，批；IL-6试剂盒（北京华英生物技术研究所，批；TNF-α试剂盒（北京华英生物技术研究所，批；LDZ5-2型低速自动平衡离心机（北京医用离心机厂）；SPECTRA MAX 190酶标（AD公司）；ULT1386-5-V42超低温冰箱（Thermo Fisher Scientific（Asheville）LLC）；倒置显微镜（德国莱卡公司）。 　　2 方法 　　2.1 分组及给药方法 将50只成模的DF大鼠随机分为5组：模型组、二甲双胍组、TSM高、中、低剂量组（生药12.44，6.22，3.11 g?kg-1），各10只，另设空白对照组。各组于造模后次日灌胃给药，每日1次，每次10 mL?kg-1。各组所给药物及给药量如下：对照组与模型组用生理盐水（NS）；二甲双胍组每次给药量0.135 g?kg-1（用0.5%的羧甲基纤维素钠配成0.013 5 g?mL-1）；TSM高、中、低剂量组，每次给药