一株多重耐药鳗源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定.pdfVIP

一株多重耐药鳗源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定 谭爱萍1邓玉婷1姜兰1吴雅丽1,2 薛慧娟1，2 王伟利1罗理1赵飞1 1农业部渔药创制重点实验室，中国水产科学研究院珠江水产研究所，广东广州510380 2上海海洋大学水产与生命学院，上海201306 摘要 从患病花鳗鲡的肝脏分离纯化出一株革兰氏阴性杆菌HM2，经细菌培养特性、生理生化特性和ATB Expression半自动鉴定仪鉴定，结果符合肺炎克雷伯氏菌 （Klebsiellapneumoniae）的特征。以细菌16SrRNA基 因通用引物进行PCR扩增，获得大小为1393bp的部分16SrRNA基因序列，将所测序列与GenBank中序列进行 BLAST比对并构建系统进化树，结果表明其与肺炎克雷们氏菌[JF690978]的同源性最高(100％)，在系统发育树 上与肺炎克雷们氏菌聚为一簇，进一步确定菌株HM2为肺炎克雷伯氏菌。药物敏感性试验结果显示，HM2只对 亚胺培南、链霉素、阿米卡星3种药物敏感，对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩、头孢曲松、头孢噻 肟、头孢西丁、复合磺胺、磺胺甲基异恶唑/甲氧苄啶、利福平、萘啶酸、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、呋 喃妥因、四环素、多西环素、氯霉素17种药物均有耐药性。 关键词：花鳗鲡；肺炎克雷们氏菌；鉴定；耐药 IsolationandIdentificationofamultiple-drugresistant KlebslelapnemoniaefromAnguillamarmorata JIANGLan1WUYa-li1,2 WANG TANAi-ping1DENGYu-ting1 XUEHui-juan1,2 Wei-li1 LUOLi1,ZHAOFei1 1.Keylaboratoryoffisherydrugdevelopment,MinistryofAgriculture,P.R.China.PearlRiverFisheriesResearch Institute,ChineseAcademyofFisherySciences,Guangzhou510380,China 2.CollegeofFisheryandLifeScience,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China Abstract:Onestrainofgram-negativebacteria,HM2wasisolatedfromliverofadiseasedAnguillamarmorata.The strainHM2wasidentifiedasKlebsiellapneumoniaeaccordingtoitsmorphologicandphysio-biochemical characteristicsaswellasATBExpressionsystematicidentification.Usingthegeneralprimersof16SrRNA,thegene fragmentswereamplifiedbyPCRwithabout1393bp.TheobtainedgenesequencewascomparedwithGenBankand constructedphylogenetictreeonbasisof16SrRNA.TheBLASTresultsshowedthatHM2hadthehighesthomologies (100％)withsequenceofK.pneumoniae(JF690978),andthephylogenetictreeresultsrevealedfurtherthatthisstrain clusteredtogetherwithK.pneumoniae.Bytestingwith20antimicrobialagents,HM2wasfoundtobewithhigh sensitivitytoimipenem,streptomycinandamikacin