细菌原生质体融合育种技术及其应用进展.pdfVIP

维普资讯 专论与综述 中 国 酿 造 2008年第7期 总第 184期 ·1 · 细菌原生质体融合育种技术及其应用进展 王登字，臧 威，孙剑秋 ，蒋本庆，王 鹏，李 铁 (齐齐哈尔大学生命科学与工程学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006) 摘 要：原生质体融合技术是细菌遗传育种的有效方法之一，发展迅速，应用广泛。文中综述了亲本菌株选择性遗传标记方法、影响 原生质体制备与再生因素、原生质体融合方法和条件。介绍了细菌原生质体融合技术在遗传育种中的应用，并展望了细菌原生质体 融合技术的发展前景。 关 键 词：原生质体融合；原生质体制备；原生质体再生；遗传育种 中图分类号：Q813_2 文献标识码：A 文章编号：0254-5071(2008)07-0001—05 Applicationofbacteriaprotoplastfusiontechniqueingeneticbreeding WANG Dengyu，ZAN GW ei，SUNJianqiu ，JIANG Benqing，WAN GPeng,LITie (CollegeofLifeScienceandEngineering,QiqiharUniversity,Qiqihar16wo6,Chnia) Abstract：Theprotoplastfusiontechniquewasoneofthemosteffectivewaysofbacteriageneticbreeding，meanwhileitdevelopedrapidlyandwas widelyused．Thispapersummarizedhtemehtodofselectivegeneticmarks，htefactorshtataffectedhteformationnadregenerationofprotoplastsnad htewaysnadconditionsofprotoplastfusion．h addition．hteapplicationofbacteriaprotoplastufsiontechn iqueingeneticbreednigwasreviewedin htearticleandhtedevelopmentofhtistechn iquewaslookedforwradto． Keywords：protoplastufsion；protoplastpreparation；protoplastregenreation；geneticbreednig 细菌原生质体融合 (bacterialprotoplastfusion)是20世 1．1营养缺陷型标记 纪 70年代 发展起来 的重要基 因重组技术 。1976年 营养缺陷型标记是传统有效的标记方法。融合的双亲 FODORK等 l【】采用聚乙二醇 (PEG)、磷酸钙诱导巨大芽孢 株带有不同缺陷型标记，融合后采用基本培养基可以很容 杆菌 (Bacillusmegateriutrb原生质体的融合，SCHAEFFERP 易检出融合子。DAIMH等吼以大肠杆菌 (Escherichiacolb 等翻报道了用PEG诱导枯草芽孢杆菌 (B．subtillis)的原生 菌株W4183CArg)与菌株Fu20．1(Leu)为亲本进行融合， 质体融合，这2项重要研究成果同时发表在美国科学院院 在不加Arg、Leu的M9培养基上得到融合子，融合率达到 报上，是细菌原生质体融合技术发展的里程碑，经过30余 0．05％-0．7％ 。 年的发展，已经成为细菌遗传育种的～项基本技术。细菌 1