湖南省规模化猪场猪源大肠杆菌的耐药性调查.pdfVIP

中国动物检疫2011年第28卷第3期 撩蠹蔫惫 一59一 湖南省规模化猪场猪源大肠杆菌的耐药性调查 覃开权 (永州职业技术学院农科系，湖南永州 425000) 摘要：目前兽药临床上，猪源性大肠杆菌对常用抗菌药的耐药率相当高，耐药谱也相当复杂，是目前大肠杆菌耐药的一个普 遍现象。本试验应用了13种抗菌药物对湖南地区分离的58株猪源致病性大肠杆菌进行了药物敏感性试验，实验结果显示，猪源 大肠杆菌分离菌株对 目前常用和应用时间较长的抗茵药物，如四环素、氨苄青霉素、恩诺沙星、阿莫西林、诺氟沙星等产生了非常 严重的耐药性。猪源大肠杆菌分离株对于一些新药和未大量应用于猪场的药物如安普霉素、丁胺卡那霉素等则比较敏感。因此细 菌耐药性与用药情况密切相关。 关键词：耐药性；大肠杆菌；猪 中图分类号：$852．612 文献标识码：B 文章编号：1005—944X(2011)03一o059—04 规模化、集约化养殖业的持续发展离不开抗菌药 仪器厂)、电子天平 (北京塞多利斯仪器系统有限公 物。然而，抗菌药物在养殖业的广泛使用也引起 了动 司)、SW—CJ．1F型单人双面净化工作台 (苏州净化设 物源细菌耐药性的日益加重与广泛传播。动物源细菌 备有限公司)、GHP9080隔水式恒温培养箱 (上海齐 耐药性的流行不仅加大畜禽疫病的防控难度，给养殖 欣科学仪器有限公司)、DHZ．D恒温振荡摇床 (太仓 业造成巨大损失，而且动物源耐药菌还可通过食物链 市实验仪器设备厂)、LDZX一50FBS立式 电热压力蒸 感染人体或将耐药基因转移至人体病原菌，给食品安 汽灭菌器 (上海 申安医疗器械厂)、DHG．9240A型 电 全和人体健康带来潜在危害。因此开展耐药性监测与 热恒温鼓风干燥箱 (上海精宏实验设备有限公司)。 分析对兽药残留监控发挥着积极作用，本试验重点监 1．4 试验方法 测猪源大肠杆菌对常用药物的耐药情况调查及分析。 1．4．1 分离培养 1 材料与方法 用医用棉签采集有腹泻症状猪只肛 门内的粪样， 1．1 病料 采集到后将其装入无菌的EP管或青霉素小瓶中。用 疑似大肠杆菌病的病料采集规模化猪场有腹泻 灭菌的生理盐水将粪样稀释后，吸取 O．5mL稀释液 症状仔猪肛拭标本，大肠杆菌致病菌株分离来 自湖南 加入到装有 5mL普通肉汤培养基的试管中，将试管 省不同县区的6个规模化养猪场共计 65个病料标 置于恒温振荡摇床 内37℃增菌培养 l2～16h后，用接 本，病料采集时问为2010年 7月。 种环将培养物划线于伊红美蓝琼脂平板上，置于恒温 1．2 培养基与试纸 培养箱 内37℃培养 16h后用铂金耳挑取带金属光 培养基：普通琼脂培养基、普通肉汤培养基、麦康 泽、中等大小、表面光滑圆润的暗红色单个菌落划线 凯琼脂培养基、伊红美蓝培养基、MH琼脂培养基、 于麦康凯琼脂培养基，37℃培养 16h后挑取砖红色、 LB培养基 (均购 自北京奥博星生物技术有限公司)。 中等大小、表面光滑湿润、圆形、扁平的菌落划线于斜 药敏纸片：氟苯尼考、阿莫西林、头孢噻呋钠、安 面培养基上进行保存。对保存在斜面培养基上的细菌 普霉素、环丙沙星、氨苄青霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、 先涂片，在用革兰 氏染液染色后，用 100X的光学显 庆大霉素、丁胺卡那霉素、链霉素、四环素和氯霉素 (头 微镜进行镜检，根据细菌形态和染色特点，将革兰 氏 孢噻呋、氟苯尼考、安普霉素的药敏纸片 自制，其他药 染色为阴性、两端钝圆、无芽孢、中等大