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JAK2V617F突变分型和相对定量研究一
不同来源血清和细胞因子对骨髓基
附123例慢性骨髓增殖性疾病检测结果质细胞成纤维细胞集落形成的影响
沈益民 晁红颖 张日 冯宇峰 许力1 阳文捷1朱霞1
岑建农姚利 沈宏杰 朱子玲 薛永权
林金盈1魏华萍1黄向英1毛平2
苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所
1广西壮族自治区人民医院血液科
卫生部血栓与止血重点实验室
2广州市第一人民医院血液科
目的研究JAJ2v617F突变在慢性骨髓增殖性疾病
目的 观察SD大鼠骨髓基质细胞(BMSC)体外培养
中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量
的生物学特性并加以鉴定，并探讨不同来源血清和细胞
分析。
因子对其成纤维系祖细胞(CFU—F)产率的影响．
方法对2003年1月至2008年5月苏州大学附
方法取SD大鼠骨髓，进行BMSC原代培养，传代后
属第一医院就诊的慢性骨髓增殖性疾病患者采用突变
分别观察其生长特性，绘制贴壁率，测定生长曲线，并应
特异性扩增系统(ARMSAmplification—refractory
mutation 用流式细胞仪鉴定细胞表型：采用体外长期液体培养法
sequencing)PCR方法检测JAK2V617F突变的
观察CFU—F的产率。
发生率及其突变类型；采用毛细管电泳方法定量分析
结果 原代培养的BMSCs生长良好，倍增时间约为
JAK2V617F突变转录本水平。
40小时。传代后12小时贴壁率达85％以上：胎牛血清较
结果123例慢性骨髓增殖性疾病患者共检出90
例JAK2V617F阳性，其中35例真性红细胞增多症患者脐血清和马血清能促进CFU—F的增值和分化；和对照组
中JAK2V617F阳性率100％，85例原发性血小板增多症
患者中JAK2V617F阳性率62．4j2；，低于真性红细胞增多
症患者，差异有统计学意义(PO．05)；3例慢性骨髓纤维
化患者中JAK2V617F阳性率66．7％。90例JAK2V617F突
和SDF-1(pO．05)。
变患者中共检出纯合突变35例，其中真性红细胞增多 结论体外培养的BMSCs生长稳定。传代后细胞适
症患者17例(17／35)占48．6％，原发性血小板增多症患
应性强：胎牛血清中可能较脐血清和马血清存在较多的
者17例(17／85)占20．Ojl；，低于真性红细胞增多症患者，
差异有统计学意义(PO．05)．慢性骨髓纤维化患者1
促进CFU—F的增殖。
例；90例毛细管电泳定量分析显示，35例纯合型突变患
者JAK2V617F突变转录本水平为(89．5+6．5)％，55例杂合
型突变患者JAK2V617F突变转录本水平为(57．9+6．7)名，
较纯合型突变患者为低，差异有统计学意义(PO．05)；
杂合型真性红细胞增多症患者JAK2V617F突变转录本
水平为(63．7±6．3)j2；，高于杂和型原发性血小板增多症患
者的(54．4±6．1)％，差异有统计学意义(P0．05)。93
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