通心络对络气虚滞大鼠动脉组织HO%2fCO系统影响的实验的研究.pdfVIP

通心络对络气虚滞大鼠动脉组织HO/CO系统影响的实验研究 梁俊清1 徐海波2 吴小莉1 魏聪1 贾振华1 吴以岭1 1.河北以岭医药研究院 （石家庄，050035） 2.承德医学院附属医院 （承德，067000） [摘要] 目的 通过观察通心络超微粉对络气虚滞大鼠动脉组织中HO/CO系统及其相关信号传导通路 JNK/c-Jun变化的影响，探讨通心络发挥血管保护作用的可能机制。方法 健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、 络气虚滞组、通心络组。透射电镜观察动脉组织内皮细胞超微结构，免疫组织化学染色方法观察各组大鼠动脉组 织中HO-1、JNK、p-c-Jun的表达；激光共聚焦显微镜观察JNK和p-c-Jun在细胞内的表达分布情况；RT-PCR及 Westernblot方法检测HO-1mRNA、JNKmRNA、c-JunmRNA及p-c-Jun蛋白的表达，同时检测动脉组织中CO含量 的变化。结果 与对照组比较，络气虚滞组血管内皮细胞游离面微绒毛显著减少,吞饮小泡数量亦显著减少，线粒 体大部分嵴和膜融合甚至消失，粗面内质网严重脱颗粒；而通心络组内皮细胞超微结构病理改变明显改善。免疫 组织化学染色结果显示：络气虚滞组动脉组织中HO-1、JNK及p-c-Jun蛋白表达阳性信号较对照组明显减弱，而通 心络组JNK、p-c-Jun及HO-1蛋白表达显著增强。激光共聚焦显微镜观察结果显示，JNK阳性信号位于大鼠动脉组 织细胞胞浆，p-c-Jun阳性信号位于大鼠动脉组织细胞胞核，而且大部分JNK和P-c-Jun阳性信号位于同一细胞。 Westernblot及RT-PCR检测结果显示，与对照组比较，络气虚滞组HO-1、JNK、c-JunmRNA及相关蛋白表达明显下 调，同时血液中CO的水平明显降低；而通心络组HO-1、JNK、c-JunmRNA及p-c-Jun蛋白表达明显上调，CO的释放 量明显增加。结论 通心络可上调HO表达进，而增加内源性CO的释放，发挥血管保护作用，而该作用的发挥可 能与其活化JNK/c-Jun通路有关，而且JNK激活后，主要通过磷酸化的c-Jun发挥作用。 [关键词]络气虚滞;HO/CO系统；JNK/c-Jun通路；血管内皮细胞；通心络 ThemechanismoftheeffectsofTongxiuluoultra-micro-powderonHO/COsysteminarterialtissuesofratswith stagnancyofcollateral-qiindeficiencycondition LIANGJun-qing* XUHai-boWUXiao-li *Pharmaceutical ResearchInstitute,Hebei,Shijiazhuang050035,China [Abstract] Objective ToinvestigatetheprotectivemechanismstovascularofTongxinluo,throughdetectionof HO-1/COsystemandJNK/c-Juninarterialtissuesofratswithstagnancyofcollateral-qiindeficiencycondition.Methods HealthymaleWistarratsofcleannesslevelwererandomlydividedintocontrolgroup,stagnancyofcollateral-qiinadefi ciencyconditiongroup(SCQDCgroup)andTongxinluogroup.Theultralstructureofendotheliumcellinarterywasobserved undertransmissionelectronmicroscope,immunohistochemicalapproachwasusedtoobservedtheexpressionofHO-1、JNK andp-c-Junprotein,andimmunofluorescencedouble-labellingconfocalmicroscopewasus