分批补料乙酸发酵条件的优化.pdfVIP

第 24卷第 4期 徐 州 工 程 学 院 学 报 (自然 科 学 版 ) 2009年 12月 VoL24NO．4 JournalofXuzhou Institute ofTechnology (NaturalSciences Edition) DE(：．2OO9 分批补料 乙酸发酵条件的优化 冷云伟 ，徐根娣 ，赵 梅 ，权 武 ，张 艳 (1．中国矿业大学 化工学院，江苏 徐 州 221008；2．徐州恒顺万通食品酿造公 司，江苏 徐 州 221000) 摘 要 ：利用 10L发酵罐进行乙酸分批补料发酵工艺条件 的优化：发酵前 8h采用发酵温度 3O℃、0．07VVM 的通风量；8h后采用发酵温度 32℃、0．10VVM 的通风量，并采用 间歇定量补 料方式，发酵到 12h，每 隔4h补加 0．5 的乙醇． 关键词：分批补料；乙酸 ；发酵 中图分类号 ：TQ92 文献标志码 ：A 文章编号 ：1674—358X(2009)04—0019-05 由乙醇通过 乙酸菌的生物转化获得的乙酸 ，在食 品、医药和材料领域具有众多用途 ，正逐渐成为工业发 酵产业 中的一个重要领域．本研究对分批补料技术乙酸发酵工艺 中乙醇流加浓度 、流加方式和流加时间分别 进行了研究 ，并通过 比较各项发酵指标 ，确定 乙酸发酵过程 的最优补料条件 ，为放大试验和工业生产提供了 理论参考． 1 材料 与方法 1．1 菌种 乙酸菌高产菌株 J9由沪酿 101驯化筛选获得 ，适应 乙醇浓度 8 以上． 1．2 仪器 1OLFrings通风发酵罐 ，80—2离心沉淀器 ，分光光度计 ，无菌操作台等． 2 结果与讨论 2．1 选择分批补料发酵的依据 初始酸度 4．00g／100mL，乙醇度 6 ，发酵 温度 3O℃，乙酸菌接种量 1O 下进行发酵 ，发 酵 过程 中测定残酒 、OD值、乙酸生成的情况，获得分 召 0 批发酵过程 曲线如图 1所示．可 以看 出在分批 发 0 目 酵中，乙酸的积累与菌体的生长属于部分偶联型． 墨 在发酵 10h前菌体为指数速率增长 ，乙酸合成速 率稍慢 ；发酵 10h后菌体增长减缓 ，菌体浓度维持 蓉 在较稳定 的水平 ，乙酸 的合成速率有一定 的提高 ， 发酵液 中乙酸积 累量保持较恒定增长趋势 ，同时 底物 以较高 的线性速率减少 ，28h后 因底物消耗 发酵时间 ／h 殆尽 ，乙酸合成速率减小 ，但仍有一定 的合成潜 图 1 乙酸分批发酵过程 曲线 力．这种情况表 明，只要继续供给足够 的底物 ，微 Fig．1 Courseofbatch ferm entation ofaceticacid 生物细胞仍有能力合成 乙酸 ，采用流加补料 的发 酵方式可充分利用细胞的乙酸合成能力 ，提高乙酸的产量 、转化率和生产强度． 收稿 日期 ：2009—09—14 基金项 目：863计划资助项 目(2006AA1OZ314) 作者简介 ：冷云伟(1965一)，男，北京人 ，副教授 ，硕士生导师 ，主要从事生物技术研 究 · 19 · 徐州工程学 院学报 (自然科学版) 2009年第 4期 2．2 乙酸发酵分批补酒时间的确定 以含有 6 乙醇的发酵培养液进行发酵 ，分别在发酵 10，15，20，25h时一次性补加 2 乙醇，之后继续 发酵 ，并在过程中每隔一定时间取样测定发酵液 中菌体浓度、酸度和残酒度 ，得到如图2所示的补料过程的 菌体浓度、残酒度和酸度变化曲线． 由图 2可以看到，起始补料时间为 10h和