转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究.pdfVIP

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2015-08-26 发布于重庆
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转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究.pdf

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转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究.pdf

9·40 · Ch inese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, 2006, V o l 20 (9) 转化生长因子 3 基因转染兔骨髓间充质干细胞的实验研究 1 2 3 3 邱林　金先庆　罗小辑　丁幸坡　　【摘　要】　　目的　构建转化生长因子 ( , ) 的腺病毒载体, 并通过腺病毒载 transfo rm ing grow th facto r T GF 3 3 3 体将基因转染骨髓间充质干细胞( , ) , 使其在细胞内得到表达。　方法　将 T GF m arrow m esenchym al stem cells M SC s 3 人质粒定向克隆进入穿梭质粒中, 与 1 共同转入细菌并重组, 获得重组腺病毒 T GF pA dT rack CM V pA dEasy T GF 3 3 质粒, 用脂质体法导入包装细胞H EK293 中, 48～ 96 h 后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。取 1 月龄新西兰大白兔5 只, 取其胫骨骨髓。采用密度梯度离心法分离纯化 , 并进行传代。取传至第3 代细胞采用腺病毒载体转 M SC s T GF 3 染, 10 后荧光显微镜观察绿色荧光表达, 转染重组腺病毒4 后的用免疫细胞化学方法观察在细