微生物发酵产大豆异黄酮苷元的连续超声波提取工艺及其定量分析研究.pdfVIP

※生物工程 食 品 科 学 2011，Vo1．32，No．05 239 微生物发酵产大豆异黄酮苷元的连续超声波 提取工艺及其定量分析研究 张 晓玲 ，惠芸华 ，杨 桥 (f目水产科学研究院东海水产研究所，农业部水产品质量临督检验测试 t心，上海 200090) 摘 要：选取浅玫瑰链霉菌、红色糖多孢菌及黑曲霉为发酵菌种，采用Plackett—Burman设计及止交试验，刘影响 微生物发酵泫产大豆异黄酮苷元(染料爪黄 、黄豆苷元、黄豆黄素)的连续超声波提取丁艺的主要试验因素进行系 统优化 。以浅攻瑰链霉菌为发酵菌种 的实验结果表 明：各主要试验因素对 3种异黄酮苷元提取率影响程度大小为 ： 抽提溶剂组分、超声波时间、淋洗液体积。而温度、溶剂流速两个因素与提取效率负相芙。连续超声波作用时 间及抽提溶剂组分为影响片黄酬苷元提耳又丁艺的两个j二要影响冈素。 两冈素的最优值分别为7min及70％时，总异 黄酮苷元提取牢为(98．7±1．23)％。通过固相萃耳义(SPE)可有效去除发酵提取液中杂质对HPLC定量分析的干扰，并 使 3种异黄酮苷元含最浓缩 10倍 以 ，从而使HPLC办法的检测限达到 10～~tg／mL，样品总分析时间小于 10min， 样品回收率为96．2％～103．4％，RSD值小于2．34％。上述结果表明，该方法可满足微生物发酵法产大豆异黄酮苷 元 的高效提取纯化及快速定量分析。 关键词 ：大豆异黄酮苷元；连续超声波提取；同相萃取；微生物发酵 ContinuousUltrasonicExtractionandQuantitativeAnalysisofIsoflavoneAglyconesProducedby M icrobialFermentation ZHANGXiao—ling，HUIYun—hua，YANGQiao (SupervisionandTestCenterforAquaticProductsofMinistryofAgriculture，EastChinaSeaFisheriesResearchInstitute ChineseAcademyofFisherySciences，Shanghai 200090，China) Abstract：Theaim ofthepresentstudywastooptimizethecontinuousultrasonicextractionprocessforisoflavoneaglycones includinggenistein，daidzeinandglyciteinproducedbyStreptomycesroseolus(ATCC31047)basedonPlackett—Burmandesign andorthogonalarray design．Resultsindicated thattheorderofthreepositivefactorsaffectingextractionefficiencyfrom strongtoweakwassolventcomposition(ethanolaqueoussolution)，ultrasonictreatmenttimeandeluentvolume．However， extractiontemperatureandeluentflow rateexhibitedanegativeimpactonexrtactionefficiency．Ultrasonicrteatmenttimeof 7minand solventcompositionof70％ ethanolconcentrationwerefoundoptimal，andtheextractionrateoftotalisoflavone aglyconesreach