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201
1年全国医院药学学术年会暨第71届世界药学大会卫星会
算出IC50。
空白对照组平均oz0莹一给药组平均0ID值
细胞抑制率％=——×100％
空白对照组平均雠
1．1．3荧光显微镜观察细胞形态学变化
将对数生长期的HL．60细胞接种于6孔培养板，加入等量不同浓度岩藻甾醇，阳性药组加入等体积
33258染色液，37℃避光孵育30min，荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化。
1．2．4流式细胞仪检测HL-60细胞周期及细胞凋亡率
加入2．5mL
发波长488nm，发射波长520nm测定细胞周期和凋亡率。
I．2．5岩藻甾醇对Caspase．8，Caspase．3活性的影响
书。
1．2．6统计学处理
所有数据均用叉士s表示，采用SPSSl7．0统计软件进行组间t检验，P0．05认为有统计学意义。
2结果
2．1 岩藻甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用
不同浓度岩藻甾醇对HL．60细胞增殖均具有抑制作用，随着药物浓度的增加，作用明显增强，具有
·260-
大会论文
Effectoffucosteml ofHL击0cells
F嘻l ON小oproliferation
2．2荧光显微镜观祭细胞形态学变化
清晰，染色质分布均匀．不同浓度的岩藻甾醇作用于HL-60细胞48h后，可见已破碎的核．折光性减弱，
可见致密的强荧光，这反映了细胞已经进入凋亡。给药浓度剂量组7I]xg／mL中部分细胞体积及缅胞核变
小、皱绾．并可见弼亡小体．如图2c箭头所示．随着药物浓度的增加．凋亡细胞比例逐渐增加，凋亡细
胞特征性形卷更加明显．礴亡小体增多。给药浓度284．g／mL剂量组中大部分细胞棱裂解为碎块，如图
2E箭头所示。见图2。
}。矗．．．·■：；。；?；：：?1J
E∑?蔓I!茎鐾型
D ruc。mr。】+I E Fuc。slcr。：!q
4姐#+mL j峪”l
Fi吝2 appearanceofIlL-60ce[Isbyfluorcscenccdetection
Mo甲hol晒cal
2011年全国燕院药学学术年台噩第7l届世界药学大会卫星台
2．3流式细胞仪检测HL60细胞周期及细胞凋亡辜
64％，14
的凋亡率髓药渡浓度的升高而增多，呈一定的剂量依赖性，浓度7lgg／mL组嗣亡率为15 2}Lg／mL
组捅亡辜为16
例降低，G，M期细胞比例升高，井呈一定的剂量依赖性，表明岩藻甾醇使HL咖肿瘤细胞周期阻滞于
62／M期。见表1和图3。
Tab．1Effectoffuoostemlonthe andcellofHL-60cell
apoptosiscycle
≮．黢： j豳醯 ‘隧
lCPT(2099／mL)
。i．1翟矗 土：蠡整一
!二』5露鍪一 ∑≥§篷警鏊一
大会论文
2．4岩藻甾醇对HL．60细胞Caspase一8活性的影响
计学差异(P0．05，P0．01)。见表2。
Tab．2Effectoffucosterolon ofHL-60cellsat24h
Caspase-8activity
与空白组比较-P0．Ol
2．5岩藻甾醇对HL．60细胞CaspaSe-3活性的影响
计学差异(Po．05，P0．01)。见表3。
Tab．3Effectoffucosterol ofHL-60cellsal24h
activity
Oi
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