微生物次级代谢功能改造新产活性产物与研究.pdfVIP

第十一届全国中药和天然药物学术研讨会 中国沈阳 201110 微生物次级代谢功能改造与新产活性产物研究 崔承彬’ 军事医学科学院毒物药物研究所，北京 在微生物活性产物研究过程中，为筛选获得活性菌株而分离的绝大多数菌株往往因无活性而不 能用于活性产物研究，导致大量无活性菌株被闲置或销毁，造成前期投入的极大浪费和资源开发效 率严重低下。如能对无活性菌株的代谢功能进行有效改造，使其转化成次级产物多样性丰富的活性 突变株，将会使这些菌株成为可再开发利用很好的原始资源。近来研究表明，在微生物基因组序列 中次级产物的生物合成相关基因远比已知其生产的产物多，但在人工培养条件下很多基因处于沉默 状态而不表达产生代谢产物。此外，次级代谢调控蛋白的表达后修饰调控机制也影响产物多样性。 这表明微生物实际上具备合成更多次级产物的代谢潜能，通过代谢功能改造将无活性菌株转化成活 性突变株，具有基因组以及代谢调控机制方面的理论基础，而研究建立简便实用的实验技术方法， 则是实现这种有效转化的关键。因此，课题组近几年以放线菌和真菌无活性野生株为对象开展了相 关实验技术新方法研究并取得了较好研究进展。 在放线菌相关研究中，以抗肿瘤活性为主要指标，从起初用核糖体工程技术筛选自发突变抗性 突变株开始，逐步研究建立了抗生素抗性一生物活性组合筛选、化学诱变结合抗生素抗性一生物活 性组合筛选、微波诱变结合抗生素抗性一生物活性组合筛选、四氧化三铁磁性纳米粒辅助微波诱变 结合抗生素抗性一生物活性组合筛选等，操作比较简便、适于由无活性野生株筛选获得活性突变株 的组合实验技术新方法。在真菌相关研究中，则组合利用影响真菌细胞壁膜功能的多种理化因子和 作用于核糖体的抗生素，首先考察了通过组合作用可否影响细胞壁膜通透性来干预和改变真菌次级 代谢，继而再与抗肿瘤、抗真菌等活性指标结合，逐步研究建立了DMSO介导抗生素抗性一生物活 性组合筛选、DMSO介导化学诱变一生物活性组合筛选、超声诱变或超声介导抗生素抗性一生物活 性组合筛选等，由真菌无活性野生株可高效筛选获得活性突变株的组合实验技术新方法。利用这些 新方法，我们已由放线菌和真菌无活性野生菌株成功转化获得了许多活性突变株并用于新产活性产 物的研究。 在新产活性产物研究中，采用活性跟踪与化学检测分析相结合、微量预试先导一放大实验制备 的实验模式，经与无活性的原始菌样品直接对照，从突变株发酵物中跟踪分离原始菌发酵物中没有 的活性产物，继而利用现代谱学以及化学方法，研究阐明了所得活性产物的化学结构。在此过程中， 结合实际分离工作，探索建立了快速跟踪分离了突交株新产活性产物的实验方法。利用该方法，从 十余株活性突变株发酵物中已研究阐明了原始菌所不生产而突变株新产活性产物数十种，其中包括 新颖结构在内的十余种新化合物。迄今已阐明的突变株新产活性产物有生物碱类、萜类、大环内酯 类、蒽醌类、咕酮类、甾类、脂酰胺类、炔类、大环内酰胺类，以及不好归类的多种其他类等，所 涉及次级产物结构类型极为丰富。这表明突变株的很多条生物合成途径已被激活，次级代谢功能得 到有效改造，从而代谢产生了原始菌所不生产的结构类型丰富的活性产物。这些结果表明，利用所 建实验技术新方法，可对无活性放线菌和真菌次级代谢进行有效改造，从而将无活性野生株转化成 活性突变株并供新产活性产物研究，从中发现活性新化合物。 在本次学术会议上，将主要对上述研究及其相关新近进展进行交流和讨论报道。 关键词：海洋来源微生物；海洋来源真菌；海洋来源放线菌；代谢功能改造；活性产物；抗肿瘤；抗真菌 术研究发展计划：No．2007AA092411； 1 (D1暇M-15-02·2-09)；AMMS(2008) 作者简介：崔承彬(1956一)，男．吉林省通化县人，博士．研究员．主要研究领域为天然活性产物研究． 电话：010传真：010-6821 1656，电子邮件：cuicb@sohu．com,cuicb@126．com． 6