快速、高通量MTHFR基因C677T多态性检测方法的建立.pdf

箜四至匿盔堂堂塑(!些!些竺丝塑型旦!!12呈Q堕i!鱼(!璺2堕巳!么j竺!竺丛墅翌坚：型!：婴 1335 ·研究原著· 快速、高通量MTHFR基因C677T多态性检测方法的建立 薛 丽1，白玉杰2，朱文伟1，杨芳2，闫小君2，董秀珍1 (第四军医大学：1生物医学工程系医学电子工程教研室，2药学系全军基因诊断技术研究所，陕西西安710033) hydrofolate A and detection rapidllighthroughput 方法．方法：提取健康人外周血基因组DNA，采用PcR扩增 method0fC677T in polymorp崎sm MTHFR dNTPs和游离单链引物消化处理后进行TDI反应，测定荧光 gene X晒厶1，鲋，玩一胁2，Z肌，耽n一耽i1，蚴ⅣG此n92，yAⅣ瓜一 血D一．，un2．DOⅣG．戤u一．Z^enl MTHFR c677T基因型：c／c40例、T／T14例、c／T46例； 1 12 ofMedicalElectronic SchoolofBio— PCR—RFLP分析MTHFRc677T基因型：C／C40例、T／T Department Engineering， 例、C／T48例；其中两种方法检测结果不一致的两例标本经 medical InstituteofGenetic Technology En舀neering，2 Diagnosis 焦磷酸微测序证实为T／T纯合子．结论：建立了一种新的基 ofChinese of U— PLA，SchoolPha珊acy，FourthMilitaJ了Medical 于TDI-FP的MTHFRc677T基因分型方法，该方法较RFIJP niversitv，Xi’an710033，China 方法更为准确，且快速、简便、通量高，适用于临床大批量标本 的筛查． a and 【关键词】5，lo．亚甲基四氢叶酸还原酶；基因型；多态性，单 【Abstract】AIM：TodeVeIoprapid highthroughput 0f 核苷酸；荧光偏振 detectiOnmethOdof()677TpOIVmOrphismmethVlenetetra- 【中图号】Q987 【文献标识码】A hydrofolatereductase(MTHFR)gene．METHoDS：Ge- nOmicDNAwasisOIatedfromhumanblOOdcellsandthe MTHFR 677-sitewas genefragmentcOntaining ampIified O 引言 PCR．TheresidualdNTPsand inthePCR using pnmers wereremOved Thetem- prOductS