电针对AD模型大鼠额叶和海马区磷酸化P38MAPK的影响.pdfVIP

志,2006,16(4):226-227. [11]郭长青,张莉.针灸学现代研究与应用[M].北京:学苑出版社,1998:24-25. [12]王磊,李学武,张莉.艾灸疗法作用机理国内外研究进展[J].中国针灸,2001,21(9): 56-57. [13]Rufer N,Migliaccio M,Antonohuk J,et a1 ．Transfer of the human telomerase reverse transcriptase(TERT)gene into T lymphocytes results in extension of replicative potential[J].Blood,2001,98(3):597-603 ． 电针对AD 模型大鼠额叶与海马区磷酸化 P38MAPK 的影响 周丽莎 朱书秀 （江汉大学医学院中医系，430056 ） 丝裂原激活蛋白激酶（Mitogen-Actived protein kinase ，MAPK ）是一类丝氨 酸/苏氨酸激酶，由多种同功酶组成，其中 P38 可被炎性细胞因子和应激信号激 活从而引起应激反应，导致细胞生长停滞和凋亡。研究发现，AD 的病理变化与 一些细胞信号转导途径密切相关，程序性细胞死亡途径的失调是神经元缺失的重 要机制。因此，研究神经退行性病变过程中的信号转导过程，以及电针阻断这些 转导过程对细胞的保护作用，可为电针防治 AD 提供相应的理论依据。 1 实验材料 1.1 实验动物 SD 大鼠 100 只，雌雄各半，24 月龄，体重 350~450g，由华中科技大学同济 医学院实验动物学部提供（SCXK[鄂]2004-007 ）。用 Y 型水迷路法粗筛，凡 15 次测试中正确次数达 12 次以上者为合格。 1.2 药品及试剂 Aβ1-40 （BoiSource 公司），兔抗大鼠 P38MAPK 、p-P38MAPK 多克隆抗体 （Santa Cruz Biotechnology)。 1.3 主要实验仪器 脑立体定位仪江湾 Ⅱ型（上海江湾医疗器械厂），PowerPAC300 电泳仪 Bio-Rad ，USA ），PowerPAC200 电转仪（Bio-Rad ，USA ），DYY 型电泳槽（北 （ 京六一仪器厂）。 348 2 实验方法 2.1 动物分组 从 100 只 24 月龄大鼠中筛选出 80 只正常老年大鼠，再从 80 只 SD 大鼠中 随机筛选出 24 只，分别归入正常组和假手术组。从造模成功的大鼠中随机筛选 24 只归入模型组和电针组，每组 12 只。 2.2 AD 模型制备 Aβ1-40 孵育：用 0.1%三氟乙酸将 Aβ1-40 稀释成 10µg/µl，37℃孵育 1 周， 使其变为聚集状态的 Aβ1-40。 造模方法[1]：大鼠给予 10%水合氯醛麻醉后，按大鼠脑立体定位图谱进行 定位，在前囟点后方 1.4mm，中线旁开3mm，用牙科钻钻一小孔穿颅（直径1mm）， 垂直插入微量注射器，使针尖自颅骨表面进针 7mm 至 Meynert 核。模型组左右 侧各注射 1µl （10µg/µl）Aβ1-40 聚集液，假手术组注入等容积生理盐水。造模 完成后第 31 天，对大鼠再次进行 Y 字型水迷宫筛选，凡 15 次测试中正确次数 较造模前下降 1/3 者为造模成功[2]。 2.3 电针治疗 电针组：造模完成后第 32 天开始，取 “百会”、“太溪”、 “足三里”，用普 通 Φ0.38mm×15mm 不锈钢毫针针刺，百会向前以 15º 角斜刺 10mm，足三里直 刺 5mm，太溪直刺 3mm，接 G6805-2 型电针治疗仪（左右太溪与左右足三里各 为一对电极，太溪接正极，足三里接负极），连续波，频率2Hz ，强度 1mA，留 针 15min，每天 1 次，6 天为一疗程，疗程间隔 1 天，治疗 2 疗程。 正常组、假手术组及模型组不行针刺治疗，四组同步饲养。 2.4 标本采集与处理 电针治疗结束后，断头取脑，并立即在冰台上分离海马和额叶，在冰浴下将