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Thesisfor
Master’S of in2011
DegreeShan嫡University
StructureandfunctionofAlanineracemasein
PseudomonasYZ-26
putida
Name JunfinLiu
SupervisorProf．YaweiShi
andMolecular
Major Biochemistry Biology
FieldofResearchProtein and
Chemistry
Engineering
Instituteof
Department Biotechnology
ResearchDuration2008．9-2011．6
June，2011
万方数据
目 录
中文摘要……………………………………………………………………………………I
第一章文献综述…………………………………………………………………………．1
1．1丙氨酸消旋酶……………………………………………………………………l
1．1．1丙氨酸消旋酶的分布………………………………………………………1
1．1．2丙氨酸消旋酶的结构……………………………………………………1
1．1．3丙氨酸消旋酶的作用机制…………………………………………………2
1．1．4丙氨酸消旋酶与疾病………………………………………………………3
1．1．5展望…………………………………………………………………………4
参考文献………………………………………………………………………………5
第二章丙氨酸消旋酶Air的克隆，表达及活性分析…………………………………．7
2．1前言……………………………………………………………………………………………．．7
2．2材料………………………………………………………………………………．．7
2．2．1载体和菌株…………………………………………………………………7
2．2．2主要的酶和化学试剂………………………………………………………7
2．2．3主要的仪器设备……………………………………………………………7
2．3方法…………………………………………………………………………………………………………7
2．3．1丙氨酸消旋酶Air的克隆…………………………………………………7
2．3．2重组质粒的构建……………………………………………………………8
2．3．3重组Air的表达与纯化……………………………………………………8
2．3．4丙氨酸消旋酶的测活体系的构建…………………………………………9
2．3．5
Air的分子量测定…………………………………………………………一9
2．3．6测定Alr的基本动力学参数……………………………………………．．10
2．3．7温度、pH及二价金属离子对丙氨酸消旋酶Air的影响………………10
2．4结果及讨论……………………………………………………………………．．11
2．4．1丙氨酸消旋酶Air的克隆………………………………………………．．11
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