阿特拉津对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响.pdfVIP

其它研究 serum weredeterminedinvarious ofanimals．Results：Itshowedthatclearanceof lysozyme groups neutral release was decreasedin red，NO andserum lysozymesignificantly high—dosegroup．And inmediumandlowdose Was decreased．The IL—land lysozyme groupssignificantly production TNF—aof didn’tshow difference．Conclusion：ATZshowed everygroups anysignificant inhibitory effectonfunctionof in beasensitiveindicatorfor peritoneal mice．and macrophages iysozymemtght ATZ’Seffecton immune non—specificsystem． Keywords：Atrazine；Peritonealmacrophages；Cytokine；NO：Lysozyme 属三氮苯类除草剂，分子式为CsHl4ClN5，其化学结构式如图l。 警H3 H3c人2i 图1：阿特拉津的化学结构 ATZ作为。一种低毒、高效的除草剂，在世界范围内广泛使用已经有近50年。由于半衰期长 lll，ATZ及其降解代谢产物己在世界许多国家和地区的水、大气等环境介质中检测出来【2】。目前 研究证明，阿特拉津可对动物的激素分泌和生殖功能产生影响，已被列为环境内分泌干扰物质 [31。近年来国内外研究还表明ATZ可对实验动物产生一定的神经毒性和免疫毒性降51。本研究通 过28天体内灌胃给予小鼠不同剂量的ATZ后，通过测定其对腹腔巨噬细胞中性红吞噬活性， 产NO能力。分泌ILl及TNF-a水平，评价ATZ对腹腔巨噬细胞功能的影响，为综合评价其 免疫毒性提供依据。 1材料与方法 1．1主要试剂 恒瑞医药股份有限公司；几．1和TNF．GtELISA检测试剂盒购自RD公司：NO检测试剂盒购 自南京建成生物有限公司；RPMI1640培养基购自成都哈里生物有限公司；胎牛血清购自GIBCO 公司；其余试剂均为国产分析纯。 1．2实验动物和处理 SPF级健康Balb／c小鼠，雄性，共50只，“8周龄，购自简阳实验动物繁殖中心，动物合 组为环磷酰胺40mg／kg．bw，阴性对照组以溶剂灌胃。灌胃染毒时间持续28天。 1．3小鼠腹腔巨噬细胞的分离f6】 于实验前4d给小鼠腹腔注射0．2％mL2％SRBC(v／v)。实验当天颈椎脱臼小鼠，以酒精浸 泡5s，剪开小鼠腹部皮肤，向腹腔内注射无菌Hank’S液2mL，轻揉小鼠腹部后静置两分钟，将 完全培养液将调整细胞浓度为1x106／mLo 42 其它研究 1．4吞噬功能的中性红测定【6】 件下培养3h，取出，弃上清以生理盐水漂洗两次，每孔加入1009L细胞溶解液(无水乙醇：无水 乙酸=l：1)，放入412冰箱中过夜后，于酶标仪在540nm波长处比色。 1．5NO、IL．1及TNF．a的测定 集细胞培养上清，采用ELISA试剂盒测定lLl及TNF-ct水平，硝酸还原酶法测定NO含量。 操作均严格按照试剂盒说明书进行。 1．6血清溶菌酶含量的测定 剂盒测定血清溶菌酶含量。操作严格按照试剂盒说明书进行。 1．7数据分析 试验结果均用均数士标准差表示(x虹)，采用医学统计软件PEMS进行分析，组间比较采用 方差分析，P0．05为差异有统计学意义。 2结果 2．1ATZ对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 见表l。随着剂量升高，各组吸光度逐渐降低，ATZ高剂量组与阳性对照组的吞噬中性红 吸光度值与阴性对照相比有统