降糖三黄片对2型糖尿病大鼠胰腺氧化应激作用的影响.pdfVIP

lI卜景医学求真·实验硬究 难点。降糖三黄片在临床上用于预防与治疗2型糖尿病及其并发症己多年，疗效明确。为进一步明 确作用机制，进行了其干预内质网应激介导的胰岛B细胞凋亡方面的研究。现将结果报道如下。 l材料和方法 ‘1．1实验动物 选择体重509～809SPF级雄性Wistar大鼠52只(南方医药大学实验动物中心提供，广东省 附属医院SPF级动物实验室内，自由进食，12h光照周期。 1．2试剂 ，‘兔多抗，abcam公司)；SOD、如A、6SH测定试剂盒(南京建成生物工程公司) 1．3型糖尿病大鼠模型的建立、分组及给药方法 通饲料(总热量6．94J／g，其中蛋白质23％，碳水化合物535，脂肪5％，广东省实验动物中心)喂养， l％比例添加，广东省实验动物中心)喂养，共喂养1个月。 链脲佐菌素腹腔注射造模阶段：分组喂养1个月后，禁食12小时，高胎饲料喂养组大鼠按 血糖≥16．7mmol／L，持续3d以上，且有多饮、多食、多尿现象表明造模成功纳入本实验，随机分为 腔内注射等量柠檬酸缓冲液。造模后2型糖尿病组与二甲双胍组各死亡3只大鼠，弃去。 胍)组药量按照157．5mg／kg／d的剂量灌胃，正常对照组与2型糖尿病模型组给予等体积蒸馏水灌胃。 1．4取材及指标检测 实验12周，大鼠禁食12h，称量体重后，用1096水合氯醛麻醉，腹主动脉采血后，摘取胰腺， 用冷生理盐水冲洗，滤纸拭干，称重，剪碎，加入9倍冷生理盐水电动匀浆机制成10％胰腺匀浆， 在4℃下，3500 r／min离心15rain，取上清液测定。 1．5胰腺组织匀浆液SOD、MDA、GSH含量测定 SOD含量测定采取黄嘌呤氧化酶法，MDA含量测定采用硫代巴比妥法，GSH含量测定采用二硫代 二硝基甲酸比色法，三者均按照试剂盒说明具体操作。 1．6统计学处理 应用SPSSl6．0软件进行统计分析，计量资料用i±s表示，多组间比较采用单因素方差分析， PO．05为差异有统计学意义。 2实验结果 2．1大鼠的一般情况 在高脂饲料期问，高脂饲料喂养的大鼠体型肥胖，皮毛光滑，光泽度好，与正常对照组人鼠相 比，体重明显增加。 353 全同第十几次伸景学说学术年会论文集 腹腔注射STZ后并确定造模成功之后的整个实验期间，与正常对照组相比，2型糖尿病模璎组 大鼠多饮、多食、多尿、消瘦症状明显，体重较前明显-卜．降，精神状态差，易激惹，皮毛颜色加深 变黄，无光泽，易出汗，尿色深黄，大便干结、量少。 降糖三黄片治疗组大鼠上述症状稍改善，尤其精神状态、皮毛颜色、光泽度、大便干结程度与 数量明显优于2型糖尿病治疗组，平均进食量、进水量较2型糖尿病治疗组减少。 2．2降糖三黄片治疗前后大鼠体重、空腹血糖、空腹胰岛素改变(表1) 实验后，降糖三黄片治疗组大鼠体重上升明显，实验前后均数差值有统计学意义(PO．01)；FB6 下降明显，实验前后均数差值有统计学意义(PO．01)；血清胰岛素含量下降明显，实验前后均数差 值有统计学意义(PO．01)(见表2) 表1降糖三黄片治疗组实验前后各项指标均数比较(i±s) 2．3胰岛组织SOD、MDA、GSH含量 治疗8周后，各组人鼠胰腺组织SOD、MDA、GSH含量，如表2所示。 表2治疗后各组人鼠胰腺组织SOD、MDA、GSH含鼍的比较(i±S) 3讨论 胰岛素抵抗与胰岛B细胞分泌胰岛素不足是2型糖尿病发生发展的两个主要病理生理机制，随 着研究的深入，现在越来越多地认识到胰岛B细胞分泌胰岛素不足在2型糖尿病发生发展中起重要 作用。胰岛B细胞质量动力学变化受代谢因素的影响，通过其新生或再生、凋亡或坏死保持动态平 衡，而当凋亡I‘优势时，13细胞急剧减少，功能缺陷，导致2型糖尿病的发生。因此，阻止B细 胞破坏、促进13细胞再生长是治疗糖尿病的重要措施。近年来研究发现，由糖脂毒性、炎症介质等 囚素介导的氧化应激(OxidationStress，OS)是导致2型糖尿病患者B细胞凋亡的重要原因。 氧化应激是体内自由基和抗氧化防御系统失衡，导致促氧化能力高于抗氧化能力造成的一种病 理现象。许多研究证实，糖尿病发生发展与自由基引发介导的机体氧化损伤以及抗氧化防御系统清 除自由基能力下降有关。糖尿痫状态下，自由基生成增多，引起生物膜脂质过氧化，组织内蛋向及 酶变性DNA损伤，细胞凋亡，纽织损伤，功能紊乱，糖尿病人鼠胰腺组织