高效液相色谱法测定间乙酰氨基苯胺中杂质含量.pdfVIP

高效液相色谱法测定间乙酰氨基苯胺中杂质含量* 洪成清 温（州染料化工总厂 温州 325003） 因样品是盐酸盐，需缓冲剂予以中和。pH7～3， 1 前言 对二酰保留值无影响：pH7～?5，一酰及间苯二胺保 间乙酰氨基苯胺 简（称一酰 是染料中间体，由 留值也基本不变，但低于4.5时则明显减小。这是因 间苯二胺经一酰化制得，其中有未酰化的间苯二胺 为芳胺部分电离成带质子的酸式型体所致，为抑制 及二酰化副产物，N,N-二乙酰替间苯二胺 简（称二 芳胺电离并考虑柱子的pH使用范围，pH6.5是适 酰）。这些杂质影响染料的质量，且尚无合适的测定 宜的。 方法。本文用反相高效液相色谱成功地分离并测定 表1各组分色谱保留方程式2（3 ） 了这些杂质的含量。 2 实验部分 2.1仪器与试剂 3.3检测波长的选择 2.1.1 仪器 Waters510泵 486紫外可见分光光 度检测器 746数据处理机；μ-BondapakC18色谱柱 10m,3.9mmi.d.×300mm。 2.1.2 试剂 甲醇，分析纯；缓冲溶液，1%磷酸氢 二钠，用磷酸调pH为6.5；标准品间苯二胺盐酸盐、 一酰盐酸盐、二酰均由作者提纯或自制。 2.2样品制备 1g湿样品溶于100mL水中，过滤，取1mL用流 动相稀释至25mL，进样10L，外标法计算含量。 2.3 色谱条件 流动相：甲醇-缓冲溶液(35:65)，流速0.8mL/ min；常温；检测波长239nm。 3 结果与讨论 3.1 甲醉浓度及色谱保留方程式 在上述色谱条件下 室（温23℃妫）中间体各组分能 很好地分离 （图1，各峰容量因子k分别为0.32， 0.56,1.15。 流动相中甲醇浓度CB和1ogk的关系符合反相 波长扫描发现，小于254nm时各组分吸光值都 色谱保留方程式：1ogk=a+cCB1]。在不同甲醇浓 有不同程度的提高，在239nm间苯二胺对一酰的峰 度下测得k经线性回归求得各组分保留方程式系 面积相对响应值最大，是254nm的两倍以上 一（酰重 数，见表1,1ogk-CB关系见图2。 量以盐酸盐计，前者0.87，后者0.41。该条件下二酰 3.2流动相pH的选择 的相对响应值也稍有提高，这有利于提高杂质检测 *本文收稿日期：1993年7月24日，修回日期：1993年11月1日 的灵敏度。 关键词 高效液相色谱，间苯二胺，N,N-二乙酰替间 3.4 工作曲线及检测精密度 苯二胺，间乙酰氨基苯胺 外标法测定间苯二胺及二酰，二者浓度在1 参 考 文 献 15μg/mL范围内相（当样品含量0.25～3.75% ，工 作曲线呈良好线性关系 （γ＝0.9999），典型样品经 1 陈 农，张玉奎，卢佩章．色谱，1993;11(2):72 2 陈 农，张玉奎，包绵生等．色谱，1989;7(5):280 4次测定，间苯二胺X=0.623%，标准偏差S＝ 3殷 芬．色谱，1988;6(3):147 0.005，变异系数CV＝0.8%。二酰X＝1.336%，S 4 松下秀鹤，盐崎卓哉，半田隆等．分析化学 （日），1987; =0.02，CV=1.5% 。主成分用重氮化法测定后减 36:244 去间苯二胺即得真实含量。