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促溶剂对生物催化甲基睾丸素C1.2位脱氢的影响.pdf
药物生物技术
Pharmaceutical 2007，14(4)：273～276 2_73
Biotechnology
促溶剂对生物催化甲基睾丸素C∽位脱氢的影响
马书章，别松涛，张 一，杜连祥
…‘m
(天津市工业微生物重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津300457鬻翻转裂!
AS
摘要研究促溶剂在简单节杆菌(A以^r0沈cfersim声zez1．94)催化甲基睾丸素C-．：位脱氢过程中对
甾体转化结果的影响。在简单节杆菌催化甲基睾丸素CLz位脱氢过程中加入不同的亲水性有机溶剂，以甲基睾
丸素的转化率为指标，选择最适的亲水性有机溶剂并确定其最佳的添加量，同时研究不同的促溶剂配比对转化
的影响。结果发酵液中单一的添加4％的甲醇时底物甲基睾丸素的转化率可达80％，添加1‰的Tween-80可使
转化率达到46％，两者作为混合促溶剂同时加入，对转化率的提高更明显，达到81％。因此选用4％的甲醇和
o．1‰的Tween_80作为混合促溶剂对整个生物转化过程有良好的促迸作用。
关键词甲基睾丸素；简单节杆菌；促溶剂；生物转化
中图分类号：Q574。R914文献标识码：A 文章编号：1005—8915(2007)04一0273一04
AS
1．94)
美雄酮(methallmenone)是一种蛋白质同化激简单节杆菌(Ar娩加沈c地rsimpZez
素[1]，可以通过简单节杆菌生物催化甲基睾丸素 天津科技大学应用微生物室保存。
C1．z位脱氢获得[2≈]。通常甾体化合物的水溶性很差1．2培养基
(10。4～10‘5mol／L)，而甾体G．：位脱氢酶又为胞内种子培养基(g／L)：葡萄糖10，酵母膏2．5，
酶，这就决定了只有扩散进入细胞的底物才能与酶 KHzP042．5，玉米浆12
接触并进行有效转化，整个过程可分为酶促反应(即 发酵培养基(g／L)：葡萄糖20，酵母膏5，KHz
O
扩散进入细胞的底物分子在酶催化作用下转化为产 P042．5，玉米浆5，蛋白胨2．5，MgsO。．7Hz
7．0，
物)和扩散(包括底物颗粒的溶解，底物分子向细胞 0．05，自来水配制，20％NaOH溶液调至pH
内的扩散和产物分子向细胞外的扩散)两部分[4|，其121℃湿热灭菌20min。
中底物的溶解被认为是该过程的控制步骤睁6|。因 1．3试剂
此，促进甾体底物／水混悬液中底物的高度分散，加速 甲醇，乙醇，二甲基甲酰胺，二甲亚砜，丙酮，
底物的溶解和底物分子的传递，是除优化菌体生长与 Tween80，TritonX一100，Silicone，Lecithins，
产酶外，提高甾体转化反应活f生的另一关键因素。
本文目的是通过向简单节杆菌生物催化甲基 分析纯试剂。
睾丸素CⅥ位脱氢的反应体系中加入亲水性有机 1．4主要仪器设备
溶剂和表面活性剂，使该反应体系在存在高浓度底 HYpII型回旋式恒温调速摇瓶柜(上海欣蕊
物的前提下，获得较高的转化率。为此，对比了多 自动化设备有限公司)；wS2—134—75电热恒温培养
种亲水性有机溶剂及表面活性剂对生物催化的影
响，确定了
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