分泌抗人乙酰胆碱受体抗体骨髓杂交瘤细胞的制备及鉴定.pdfVIP

doi：lO．3969／j．幽．1000-铝4X．20lO．09．009 分泌抗人乙酰胆碱受体抗体骨髓杂交瘤细胞的制备及鉴定 赵 青 尹娜 张 伟 (中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院，北京100|005) 中国图书分类号R392．12文献标识码A 文章编号 10吣4甜x(加10)09．咖6．叫 Ql弧基，Ni- [摘要】 目的：从人鼠骨髓制备抗人乙酰肌碱受体(AchR)的单克隆抗体。方法：在E．∞矗中表达人Ac}IR ⅣrA层析纯化包涵体，并经透析复性。用所纯化的蛋白免疫【厕s大鼠诱导重症肌无力，免疫后大鼠的脾脏和骨髓分别与骨 al哑基的膜外区，用复性蛋白免疫大鼠诱导出重症肌 髓瘤细胞融合制备单克隆抗体。结果：成功在E．∞丘中表达r人AchR 无力症状。用免疫大鼠的脾脏和骨髓分别制备了单克隆抗体。结论：町以用制备杂_|交瘤的方法将骨髓B细胞永生化，为进一 步研究萤症肌无力发病机理和检测奠定了基础。 [关键词]AchR；骨髓；杂交瘤；重症肌无力 andcharacteri盈tion0fanti-h咖豫n Preparation nmrmw f廿omratbone ZHAo Q堍，YⅢNa，ZH州GW￡i．hta眦《陆泌Med谊击Sc证nces，ch沌se 鼬记胍加妇，尸％i愕跏面帆胍d删cof姆e，＆咖酱100005，吼in口 anti—AchR啪noclonal粕tibodies舶mmlbone眦ⅡTow．Memods：r11leex岫ceUuIar0fhum明 [Abs呐Ict]Obj枷ve：To prepare re画on AchRa1 Ni-NTA E．枷觚d咖fiedus吨a col哪．Then岫pmtein惴旆ldedby s蜘!惴expressedin muni蒯诵th AcIlRal㈨l朋dBceUs缸粕bo肥m删wand weremsed埘th Io rr姘10clonalantibod- pllrified spleen nlyelo瑚丑cellsgenerale therefolded 0f alsIlbunit inE．∞“．‰immunized埘th we陀showIl ies．R俗珂恬：HUm帅AchRw鹊succ单s觚lyexpfessed pmlein s)，ITlpcoms celkwefe Bcellsf梳ratbonenla咖w卸d cellscallbeim— Myas山eIliagmvis．Hy确donmpmduced啷ing spleen．CImcIu鲡m：B0肿lnanDw canI，eus。dforfnllerof method，which momllized吣ir唱hybri山ma snJdyMyastherIiagravis． 【Ke，r帅rds]AchR；Bone gra“s ma聃w；Hybrid‘煳；My鹅th砌a 重症肌无力(Myastheniagravis，MG)是一种横纹表现等方面已被证明与MG患者极为相似，其中大 肌神经肌肉接头处信号传导障碍的自身免疫性疾 鼠模型可以模拟人的MG的慢性发病病程，因而应 病。该疾病的发病机制与自身抗体与神经肌肉接头 用最为广泛。 处突触后膜烟酰胺型乙酰胆碱受体(AchR)的结合 机体中多个部位的浆细胞可以产牛抗体，骨髓 密切相关