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Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析.pdf
山东农业大学学报(自然科学版),2007,38(4):509—514
JournalofShandongAgriculturalUniversity(NaturalScience)
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
娄忠子1,王天户1,董李民2,刘思当h
(1.山东农业大学动物科技学院基础兽医系,山东泰安271018;2.莱阳市河洛镇兽医站,山东莱阳265200)
摘要:采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)检
测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCVI污染的PK—15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型
圆环病毒山东泰安株(PCV2sdt)。间接免疫荧光试验(IFA)检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全
基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框(ORFI)、2号开放阅读框(ORF2)和全基因组序列扩增,得到长
4%之间。
关键词:猪Ⅱ型圆环病毒;双抗体夹心ELISA;PCR;病毒分离;间接免疫荧光试验
中图分类号:,5852.65+1文献标识码:A 文章编号:1000—2324(2007)04—0509—05
oFPCV2SDTAND
lSoLATIoNANDIDENTIFICATIoN PHYLOGENETICANALYSIS
LOU Tian—hu,DONG
Zhong—zi,WANG Li—min,LIUSi—dang:It
ofAnimalScienceand
7(College VeterinaryMedicine,ShandongAgriculturalUniversity,Taian271018,China)
the of immunosorbentand chainl_eac··
Abstract:With
helpantigen—-captureenzyme—-linked assaypolymerase
tissuesof werefromTaian detectedfor cir-
tion,differentailingpiglets,which Shandongprovince,were porcine
weretreated wasnot
covirus andtheninoculatedPK一15which
type2(PCV2).The
positivesamples polluted
ofPCV2namedPCV2sdtWasobtained.Aftertheinoculationof
PCVltoisolate astrain
by PCV2.Successfully
virus fluorescent Wasusedtofindthe fluorescenceinthe
sample,indirectantibody(IFA)methodeffect,and
cellswereextractedandusedto whole
cellsWasdetected.DNAfromthe andthe
templates amplifyORFl,ORF2
bandsof about
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