健脾化湿通络法对佐剂性关节炎大鼠神经内分泌免疫网络的调控的研究.pdf

中文摘要 1．目的 以中医理论为指导，总结分析类风湿关节炎(RA)神经一内分泌一免疫 (NEI)网络的变化及中医药对其影响；通过动物实验，研究佐剂性关节 炎(从)大鼠神经递质、下丘脑一垂体一肾上腺(HPA)轴功能、血管神经 肽、调节性T细胞及Foxp3表达的变化及健脾化湿通络法其影响，基于数 据挖掘技术对上述研究结果进行系统分析，全面揭示健脾化湿通络法对 从大鼠NEI网络的调控作用及可能机制，丰富RA“从脾论治，整体调节 的科学内涵，为中医药治疗RA的机理研究提供新思路。 2．方法 2．1理论研究 通过文献研究，总结分析中医理论与NEI网络学说的关系，阐述RA NEI网络的变化及中医健脾法对其影响。 2．2实验研究 将84只Wistar雄性大鼠按随机数字表分为7组：正常对照组、模型 高、中、低剂量组，每组12只，除正常对照组外，向每只动物右后足跖 9天开 皮内注射弗氏完全佐剂o．1ml致炎，复制从大鼠模型。致炎后第1 始给予相应药物治疗30d。观察各组大鼠的体质量、足跖肿胀度、关节 炎指数；酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清5一羟色胺(5-HT)、多巴胺 0(IL-1 (TNF-Q)、白介素-1O)，内皮素一1(ET-1)和降钙素基因相关 +CD25+调节性T细胞表达频率；免疫组化法检测下丘脑糖皮质激素受体 (GR)蛋白表达；逆转录一聚合酶链反应法检测下丘脑促肾上腺激素释放激 素(CRH)mRNA表达，大脑皮质GR 免疫印迹法检测大鼠胸腺组织Foxp3蛋白表达水平。 3．结果 3．1理论研究结果 NEI网络学说与中医理论关系紧密，NEI网络的双向调节和动态平衡 是中医阴阳平衡理论及整体观念的重要体现，NEI网络在RA发病中发挥 重要作用，而中医脾脏是NEI网络的调节中枢，中医健脾法通过调整NEI 网络平衡发挥对RA的综合治疗作用。 3．2实验研究结果 3．2．1健脾化湿通络法对从大鼠的疗效分析 健脾化湿通络中药新风胶囊治疗组从大鼠的体质量增长显著高于模 大鼠足跖肿胀度和关节炎指数显著低于模型对照组(P0．01，或P0．05)， 与其余各治疗组间无明显差异(乃o．05)。 3．2．2健脾化湿通络法能抑制从大鼠神经递质5-HT分泌 研究结果显示：与正常对照组比较，模型组大鼠血清5-HT水平显著 调作用更为明显(尺o．05)，各组DA水平无显著变化。 3．2．3健脾化湿通络法能调整从大鼠HPA轴功能紊乱 研究结果显示：与正常对照组比较，模型组大鼠血清ACTH、CORT水 表达降低(P0．01)；与模型组比较，新风胶囊组能有效下调从大鼠血清 表达，作用显著优于MTX和TPT组(P0．05，或P0．01)。 3．2．4健脾化湿通络法能降低TNF-0【水平，促进IL-10分泌 研究结果显示：与正常对照组比较，模型对照组大鼠TNF-0【显著升 高，IL一1 组均能降低TNF-O【(P0．01)，升高IL-10(P0．01)；各治疗组相比，XFC 组在降低TNF-0【，升高IL-1 尺0．01)。 3．2．5健脾化湿通络法能调节从大鼠血管活性肽ET-1、CGRP水平 研究结果显示：与正常对照组比较，模型组大鼠血清及脑组织中ET-1 P0．01)。 组和XFC低剂量组(尺0．05，或P0．01)。 3．2．7NEI网络检测指标的分层聚类分析 分层聚类分析结果表明，全部检测指标分为两大类，在AA模型中表 0【、5一TH三者关系最为紧密；在从模型中表现为降低的CGRP、胸腺 在评价NEI网络各指标的变化时，可在两大类指标中选择具有较强相关性 的指标即可，其效果与检测全部指标基本是等价的，但更经济快捷，易于 发现各指标间的变化规律。 4．结论 4．1NEI网络学说与中医理论关系紧密 NEI网络的双向调节和动态平衡是中医阴阳平衡理论及整体观念的 重要体现，NEI网络在RA发病中发挥重要作用，而中医脾脏是调节NEI 网络的重要中枢，中医健脾法能从多靶点、多环节、多层次、多途径对 RA发挥整体调节作用。 4．2AA大鼠存在NEI网络功能紊乱 从大鼠神经系统功能紊乱主要表现为神经递质5-HT水平显著升高； 高，CGRP含量明显降低；免疫系统功能紊乱主要表现为致炎细胞因子TNF- 及胸腺Foxp3蛋