褐藻糖胶的分离化学修饰和清除羟自由基作用研究.pdfVIP

第26卷第5期 分析科学学报 2010年10月 V01．26No．5 ANAI。YTI(’ALSCIENCE 0ct． 2010 JOURNAI．OF 文章编号：1006—6144(2010)05—0555—04 褐藻糖胶的分离、化学修饰和清除羟自由基作用研究 张海容。，陈金娥 (忻州师范学院生化分析技术研究所，山西忻州034000) 摘 要：用酸法提取褐藻糖胶，经乙醇初步分级得褐藻糖胶HD。和褐藻淀粉HDz；褐 藻糖胶HD。经DEAE(--乙氨乙基)一纤维素柱层析，控制洗脱速度1-0mL／min，先经 二次水洗脱，然后用O～1．5mol／LNaCl梯度洗脱；浓缩、透析，得褐藻糖胶HDI和 HDlI；用氯磺酸法合成了硫酸酯化褐藻糖胶HDSⅡ；红外光谱法确定了硫酸酯键的特 征吸收。通过Fenton反应产生羟自由基模型，对比研究了褐藻多糖化学修饰前后体外 抗氧自由基性质；褐藻糖胶HDⅡ经硫酸化修饰后、通过清除·0H自由基表明，褐藻糖 胶组分HDⅡ、HDSⅡ均可作为自由基清除剂。 关键词：褐藻糖胶；化学修饰；羟自由基 中图分类号：0657 文献标识码：A 褐藻多糖主要包括褐藻酸钠、褐藻糖胶和褐藻淀粉，它们以褐藻酸盐、硫酸化多糖等多种形式存在于 细胞壁和细胞介质中。工业上海带的综合利用主要是提取褐藻酸钠、碘和少量的甘露醇。众所周知，海洋 褐藻，为化工生产、食品开发和工业加工提供了极其丰富的天然资源[13。但在化学研究、实际应用方面非 常有限。目前，尤其是褐藻糖胶和褐藻淀粉，它们的实际用途较少。研究发现褐藻糖胶的许多重要的生物 学效应和它本身具有修饰细胞表面性质能力有关。而硫酸酯多糖具有抗病毒、抗HⅣ及抗肿瘤等独特的生 物学效应，受到全世界各国相关科学家的重视Lz-s]。 实验表明，褐藻糖胶的多种生物效应与其硫酸取代度、多糖分子量分布和精细的空间结构有密切的关 系。本文对有重要应用前景的褐藻糖胶从提取、纯化、组成、化学修饰和清除氧自由基等方面进行了探讨，为 海洋资源的开发利用提供一定的理论依据。 l 实验部分 1．1仪器、试剂与材料 器有限公司分析仪器总厂)；pHS-3TC精密数显酸度计(上海天达仪器有限公司)。 褐藻，购于广州市五山集贸市场，为广东汕头产袋装干品。 1．2实验方法 1．2．1褐藻糖胶硫酸酯化硫酸酯化多糖制备：(1)酯化试剂：在附有冷凝管、分液漏斗和搅拌装置的50 mL二 mL min内缓缓滴加到100 mL三颈圆底烧瓶，冰盐浴冷却到0℃，氮气保护下，将4．5HClSO。30 甲基甲酰胺中，反应过程始终磁力搅拌。产物为淡黄色固体，冰箱保存备用。(2)氯磺酸甲酰胺法：取 0．3000 h，20％NaOH gHDⅡ褐藻糖胶于20mL甲酰胺中，搅拌1h；加入适量的磺化试剂，50℃反应4 中和至pH=6，蒸馏水透析3 d，5倍乙醇沉淀，丙酮洗涤，真空干燥。 收稿日期：2009—10—09修回日期：2009-12—01 基金项目：山西省归国留学人员科研基金(No．2008—90) *通讯作者：张海容。男，博士，教授，主要研究方向：天然植物电磁强化分离及生物分析． 555 万方数据 第5期 张海容等：褐藻糖胶的分离、化学修饰和清除羟自由基作用研究 第26卷 000～400cm_1区间扫描红外吸收。 1．2．2红外光谱分析KBr压片，4 I．2．3褐藻糖胶清除羟