姜科姜黄属植物的质量评价体系及抗肿瘤活性的研究.pdf

姜科姜黄属植物的质量评价体系及其抗肿瘤活性研究 药物分析专业博士生：周欣 指导教师：李章万教授 (Curcuma)植物。这三种中药，同科同属，仅不同种。近年来其抗肿瘤、 降血脂、抗凝血、抗炎、抗氧化等活性受到较大关注。姜科姜黄属植 物的有效成分主要是挥发油和姜黄素等。莪术油葡萄糖注射液是中国 药典1995年版二部新收载的抗病毒药，临床上常与抗菌药合用。采用 莪术油与冰片组方制成的保妇康泡沫剂具有抗菌、消炎、抗肿瘤的功 能。近年来不少报道指出姜黄素是有效的抗致突变剂，也是抗促癌剂， 美国国立肿瘤所己将其列为第三代癌化学预防药。 然而，这些植物的挥发油是一种复杂的混合物，含有20余种成分， 其挥发油的质量直接关系到其制剂的质量。中药产业现代化的瓶颈是 质量不可控、安全不可靠。传统中药质量评价方法是对某一化学成分 进行定性或定量分析。而对大多数中药来说，由于中药材的药效不是 来自任何单一的活性成分，而是来自多种活性成分。任何单一活性成 分或指标都难以准确地评价中药的真伪和优劣。色谱技术测定指纹图 谱具有综合、宏观、“模糊”的非线性特点。为加强中药生产的质量管 理和临床用药的安全，国家药品监督管理局在中药质量标准中引入指 纹图谱技术要求。 本研究的创新之处在于： 1．首次采用气相色谱一质谱联用技术(GC—MS)对姜科姜黄属植物 的挥发性成分进行指纹图谱研究，为该药材及其制剂的质量控制提供 了部分科学依据。研究中参考了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要 求》(暂行)和《中药注射剂色谱指纹图谱试验研究操作规程指南》(试 行)的规定，分别对提取方法(水蒸气蒸馏法和超临界二氧化碳萃取 法)、GC—MSN定条件等进行优化，确定了最佳的提取条件和测定条件。 在对大量不同产地和不同种的样品进行研究的基础上，以温莪术挥发 油(浙江瑞安产)、姜黄挥发油(四川产)、蓬莪术挥发油(四川双流 产)为研究对象，建立其GC—MS的共有指纹图谱；还对温莪术挥发油制 剂一保妇康泡沫剂进行了Gc—Ms指纹图谱研究，建立该成品的指纹图 谱。同时用正12碳烷做内标，建立Gc—Ms定量测定龙脑、异龙脑和莪术 醇的方法，并进行方法学考察，用所建立的定量测定方法对10个批次 的保妇康泡沫剂成品中的冰片和莪术醇进行定量测定。为了更好地体 现药物的整体性和复杂性，还采用液相色谱一质谱联用技术(LC—MS) 对蓬莪术(四川双流产)的醇提物进行指纹图谱研究。上述指纹图谱 的研究为姜科姜黄属药材及其制剂的质量控制提供了部分科学依据。 2．对姜科姜黄属的活性成分进行深入研究。姜黄素、脱甲氧基姜 黄素和双脱甲氧基姜黄素是姜科姜黄属的活性成分，其含量的多少直 接影响到该制剂的药理作用。为此，实验中从提取溶剂、提取方式和 提取时间等对三种姜黄素的提取进行考察，确定其最佳提取条件；并 建立了HPLC-DAD定量测定三种姜黄素的方法，对十多种姜黄属药材中 的这三种化合物进行定量测定。研究发现，姜黄中这三种化合物的含 量最高，莪术和郁金中三种姜黄素的含量较低。为了了解姜科姜黄属 植物的醇提物中除含有三种姜黄素外，是否还含有其它的化合物，本 研究采用LC．MS对姜科姜黄属植物的醇提物进行进一步的研究。结果 发现姜黄的醇提物部分基本只含有三种姜黄素，而莪术的醇提物中还 含有大量的莪术烯醇和莪术酮等活性成分。 3．对姜黄属植物抗肿瘤活性进行深入研究。从姜黄、莪术中分离 出姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素、莪术酮和莪术烯醇 等化合物，并用质谱、核磁共振谱进行研究，鉴定出化合物的结构： 同时对这几种化合物以及蓬莪术挥发油、姜黄挥发油和川郁金挥发油 进行抗肿瘤研究，实验表明，姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基 姜黄素、莪术酮和莪术烯醇、蓬莪术油和川郁金挥发油能明显的抑制 子宫内膜癌细胞和肝癌细胞的生长。研究表明姜科姜黄属植物的挥发 油及其活性成分如姜黄素、莪术酮和莪术烯醇等化合物具有很好的开 发前景。 本研究初步建立了姜科姜黄属药用植物及其有代表性制剂的质量 评价体系，并对姜科姜黄属药用植物中的活性成分以及其抗肿瘤活性 进行了深入的研究，为姜科姜黄属药材的种植、开发利用以及其药材 和制剂的质量控制等提供了部分科学依据。然而，中药指纹图谱的建 设还处于初级探索阶段，在得到相对完备的指纹性数据及相对合理的 数学模型后，指纹图谱的研究应进入较高级阶段的研究，即指纹特征 与药效相关性研究，指纹图谱的生物等效性的研究，以便中成药的质 量评价指标真正能反映药品的安