仿刺参中多糖活成分研究.pdf

摘 要 仿刺参(Apostichopusjaponicus 营养保健食品，具有重要的经济价值。 本课题对辽宁省大连海域的仿刺参似．japonicusSelenka)中的多糖进行了 系统的化学和生物活性研究。采取水提取法进行提取，用膜分离技术和乙醇沉淀 法纯化，Sevage法去除蛋白，双氧水脱色制备得仿刺参粗多糖。以仿刺参冻干 粉为原料提取仿刺参粗多糖的得率均值为8．55％。应用超滤装置，DEAE．纤维素 柱层析，SephadexG．100柱层析，高效凝胶过滤色谱(HPGFC)等多种分离技术 对仿刺参粗多糖进行分离纯化得到以下均一多糖组分，AJP．1(得率为5．840％)、 (得率为8．768％)。上述多糖组分经紫外扫描不含蛋白质和氨基酸，经HPGFC检 测均一性较好。 各仿刺参多糖组分样品为乳白色絮状粉末，易溶于水和二甲基亚砜，不溶于 乙醇、丙酮等有机溶剂，硫酸．苯酚反应和Molish反应均为阳性。AJP．1：相对 291 分子量为101 Da，糖醛酸的含量是样品中最高的，含量为1．1170％。／LIP．2： 010 638 相对分子量为73 Da，糖醛酸含量为0．4202％。AJP．3：相对分子量为39 716 Da，糖醛酸含量为0．5046％。AJP-4：相对分子量为9Da，糖醛酸含量较低， 213 无法检测出具体的质量百分比。AJP．5：相对分子量为2Da，样品未检测出 糖醛酸。 所得各个仿刺参多糖组分中糖组成有一定的差异，除AlP．5不含岩藻糖和糖 醛酸外，其余都含有岩藻糖、葡萄糖、氨基糖和糖醛酸。组成成分相同的多糖它 们的单糖的含量比例也不同，而且糖苷键类型也有差异。仿刺参多糖样品基本上 均含有羟基、羧基、乙酰胺基、硫酸酯基以及岩藻糖的甲基，且不同海参多糖硫 酸酯基的取代位点略有差异。所得多糖样品均为Gt构型。除AlP一5外，其余多糖 样品都主要含有C-2，4位的双硫酸酯基取代，而且大部分都同时含有C一3，4位 的双硫酸酯基取代、C一4位的单硫酸酯基取代以及未被硫酸酯化的岩藻糖。 仿刺参多糖样品的抗凝血活性实验显示，多糖样品浓度在一定剂量下显著延 长凝血酶时间fiT)。AJP一1的相对分子量大于10万，抗凝血效果最好；AJP．2 与AlP．3相对分子量在3-8万之间，抗凝效果次之；而AlP-4相对分子量在l万 左右，抗凝效果不明显。相对分子量大的仿刺参多糖抗凝效果强于相对分子量小 的仿刺参多糖，可能与多糖含有的硫酸酯基、糖醛酸、氨基糖、岩藻糖等的含量 与取代情况以及糖链结构有关；相对分子量l万以下的仿刺参多糖抗凝效果不 佳，这可能是由于多糖硫酸酯基、糖醛酸、岩藻糖含量太低的缘故。 仿刺参多糖的PTPo抑制试验显示，对PTPo酶具有显著的抑制活性，在20 I．tg／ml的浓度下，抑制率为99．8％，表明仿刺参多糖具有良好的神经保护的作用， 值得进一步研究，可应用于改善神经功能或防治老年痴呆症药物及保健功能食品 的研究开发。 关键词：海参；仿刺参；多糖；纯化；抗凝：神经保护 Il Abstract The water cold seacucumber Selenka toGenus A．japonicusbelongs Apostichopus，FamilyStichopodidae，Order Aspidochiroia,Class Echinodermata．Withthe studiesofthe Phylum rapid of ocean development