玉米ZmCIP8基因在逆境胁迫下的功能分析.pdfVIP

摘 要 本研究以玉米“郑丹958”为材料，利用生物信息学和半定量RT—PCR方法，对玉米中 基因全长，通过转基因手段，对其功能做了初步分析。在我们实验室前期研究工作的基础上， 我们筛选出5个ZmCIPKs基囚做迸一步研究，主要研究结果如下： l、在干旱胁迫下，ZmCIPKl的表达量，叶中逐渐升高，而根中先升高后下降，4C下 则表达量变化不大；ZmCIPK3在叶中逐渐升高，根中几乎无表达，4C处理后则根中有表达， 而叶中没有表达；ZmCIPK8在正常生长条件的玉米叶和根中均有一定量的基础表达，且在 干旱胁迫诱导表达，根和叶中均有表达，4C处理后则主要集中在根中表达。进一步比较发 现，ZmCIPK8受干旱胁迫影响显著。 和14个内含子，蛋白结构上具有CIPK所共有的N端激酶结构域和C端NAF结构域。 的顺式作用元件进行预测分析，该基因启动子区域具有光应答、胁迫应答、发育相关、激素 相关及其它功能未知的调控结构域。目前正开展以GUS为报告基因，通过转基因方法研究 ZmCIPK8启动子的功能。 根癌农杆菌介导，转化烟草，利用抗性筛选及PCR扩增鉴定阳性植株，并从mRNA水平上 验证ZmCIPK8的转录表达情况。抗逆相关生理生化指标叶绿素，超氧化物歧化酶，丙二醛， 脯氨酸等测定结果显示，转ZmCIPK8的植株的抗逆性明显优于野生型烟草。进一步对胁迫 相关转录因子NAC，RD29A，CBF进行表达分析，结果表明它们在转基因株系中的表达量 明显高于对照组； 挖掘玉米CIPK基因并进行功能研究，不但具有重要的理论意义，而且具有广泛的应用 价值，可以为玉米抗逆转基因育种提供潜在的有效候选基因。 关键词：玉米； CIPK；基因克隆；功能分析 英文摘要 FunctionalofMaize ZmCIPK8 Analysis Genein stress adversity Supervisor：TaiFu-ju Master Candidate：WangQi ABSTRACT：In recent kindof years，fl Ca2+sensor：calcineurl‘n special B．1ike pro— teins(CBLs)were identifiedin with plant．Interaction proteinkinase CBL—interacting an roleinthe (CIPK)，theyplayimportant ofthe ofthe de— processgrowth specific and tostressin velopment themodel response plant．In thaliana and