DEK蛋白与端酶相互作用的研究.pdfVIP

中文摘要． 摘要： 目的：DEK蛋白是一种染色质架构蛋白，宫颈癌中DEK蛋白的水平明显高于 正常子宫颈细胞，在多种肿瘤中也表现出特异性的过表达，近年来其受到了极大 的关注。随着研究的深入，DEK蛋白的研究正一步步的深入，但有关其作用机理 仍不十分清楚。我们希望通过研究DEK蛋白与在肿瘤中人们关注较多的端粒酶的 关系，来进一步揭示DEK蛋白在肿瘤中的作用机制。 HD将其 别可以在细胞内表达不同的siRNA，针对DEK癌基因进行基因沉默。 在转染实验条件确定的基础上，我们利用WesternBlot与免疫组织化学检测了 处理后细胞的DEK蛋白水平，并利用TRAP．PCR试剂盒检测了端粒酶的活性。同 期确定这两者的关系。同时检测了p53基因和MCL．1基因的表达情况，希望揭示 这两个肿瘤相关基因与DEK蛋白及端粒酶的内在联系。 结果：通过Western 的过量表达，同时，检测到转染shRNA载体后DEK蛋白在Hela细胞中的降低。 端粒酶活性检测未能看到Hela细胞内明显的端粒酶活性。通过荧光定量PCR，可 当DEK量降低时，出现了MCLl的升高。 关键词：DEK蛋白；端粒酶；RNA干扰；肿瘤；作用机制 分类号：Q7 111 jE塞童适态堂亟±堂鱼迨塞 △垦苎至垦△gI ABSTRACT ABSTRACT： PURPOSE：TheDEK isachromatinarchitecturalcervicalcancerthe protein protein，in levelofDEK is than proteinsignificantlyhigherthatofnormalcervicalcells．Andits isobservedina of ithasdrawna deal specificoverexpression varietytumors，SO great of attentioninrecent adetailedofthe years．With DEK is study protein，thereprogress tillnowitsmechanismisstillnot clear．Wetorevealthe stepbystep．but very hope betweentheDEK and also takesalotofattention relationship proteintelomerase，which intunlor．SothemechanismoftheDEK intumors couldbefurtherstudied． protein METHODS：We selectedtheHelacelllineasa usedthe studysample，andeukaryotic vector toconstruct expressionpcDNA3．1