Dickkop-1在胃癌中表达水平及诊断意义研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 背景：胃癌是当今严重威胁人类生命健康的重大疾病之一，世界范围内其发病率位 居肺癌、乳腺癌和肠癌之后，每年新发病例约 934 000 人，而其死亡率则位于癌症死因 的第二位，每年约为700 000 人，我国的胃癌发病人数更占到世界总发病人数的 40% 以 上。近年研究提示，Wnt 信号通路成分的突变和表达异常往往会促进肿瘤细胞转化、生 长、侵袭转移和血管生成。分泌型蛋白 DKK1 是 Wnt 信号通路中一种重要的调节因子， 其在肺癌、食管鳞癌、肝癌等多种肿瘤中表达异常，但与胃癌的关系有待进一步研究。 本论文从 mRNA 表达水平和蛋白表达水平研究 DKK1 在胃癌组织、血清中的表达及含 量，有助于进一步了解胃癌发生发展的分子机制，有利于寻找新的胃癌血清学诊断指标。 方法：收集河北大学附属医院 2007 年 3 月至 2009 年 6 月间对胃癌患者施行的手术 切除后标本 40 例，其中胃癌组织标本 25 例，癌旁组织标本（癌旁 3~5 cm 外）15 例， 标本均取自术前未接受放、化疗的胃癌患者。血清样本由保定市肿瘤医院和河北大学附 属医院于 2008 年 1 月至 2009 年 8 月间采集的血液制备，病人血液在未经手术切除和放 化疗前抽取。我们用半定量逆转录-聚合酶链式反应技术（RT-PCR ）和蛋白质印迹 （Western blot ）方法检测胃癌组织及癌旁组织中DKK1 mRNA 表达和蛋白表达水平； 使用酶联免疫（ELISA ）方法分析癌症病人血清和正常人血清中DKK1 蛋白含量。并用 相应生物统计学软件比较组间差异。 结果：RT-PCR 和 Western blot 结果显示，与对照组癌旁组织相比，DKK1 mRNA 和 蛋白表达水平总体无差异，但在胃癌组织中表达水平离散程度较高，部分胃癌组织中 DKK1 表达量明显上升，部分胃癌组织中表达量明显下降。而 ELISA 结果则显示胃癌患 者血清中 DKK1 含量为 4.471 μg/L （0.885-23.829 μg/L ），明显低于正常人血清的 5.015 μg/L （1.705-8.384 μg/L ），P0.01 ，在 95%置信区间内，当取含量值为 3.5390 μg/L 为参 考值时，有 61.8%的胃癌患者低于此值，而只有 15.8%的正常人低于此值，其诊断敏感 性为 61.8%，特异性为 84.2%。 结论：胃癌患者肿瘤组织中DKK1 mRNA 及蛋白表达水平与癌旁组织无明显差异， 但血清中 DKK1 含量则比正常人显著降低，提示 DKK1 可能在胃癌发生发展早期发挥 主要作用。同时胃癌患者癌组织中 DKK1 表达和血清含量水平离散程度高，一些胃癌组 I 摘 要 织中 DKK1 mRNA 与蛋白表达量显著上升，一些胃癌组织中表达量明显下降，提示其 表达水平的改变可能对肿瘤组织分型、TNM 分期、淋巴结转移等胃癌病理指标更加敏 感。胃癌患者血清中 DKK1 含量明显降低，其诊断敏感性为 61.8%，特异性为 84.2%， 从而有成为胃癌血清学诊断指标的潜在价值。 关键词 胃癌 DKK1 逆转录-聚合酶链式反应 蛋白质印迹杂交 酶联免疫 II Abstract Abstract Background: Gastric cancer is one of the most dangerous threats to human health, its incidence is in the fourth place behind cancers of the lung, breast, colon and rectum, with an estimated 934 000 new cases per yea