利用基因芯片研Gankyrin表达抑制对结肠SW480细胞基因表达谱的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 ATPase。 的调解亚单位，能够特异地结合19S调节子的S6b 最初发现GankyriIl在多种肝癌细胞中高表达。初步研究表明Ganky血在细 胞内发挥多种功能，能够与I也发生相互作用，在体内和体外促进RB的泛素化 降解；能够增强Mdm2的泛素E3酶活性进而促进Mdm2对P53的降解；能够与 功能；还能与RelA发生相互作用，抑制NF一1国通路的活性。此外，在Ras转化 细胞转化过程。 上述研究提示Gankyrin参与了肿瘤细胞内多种信号通路。但目前国内外对 GaIlk蜘n功能的研究并不深入，GaIlk徊n在细胞生长、代谢、凋亡等生理过程中， 尤其是在肿瘤细胞增殖、浸润、迁移过程中发挥的功能尚不清楚。为了探明 Gankyrin在肿瘤的发生、发展、转移过程中的功能，寻找肿瘤细胞中Gank如n参 与的信号通路，本研究尝试利用高通量基因表达谱芯片技术，分析Gankyrin稳定 干涉后SW480人结肠癌细胞中基因表达的变化，筛选出显著变化的基因，为深入 研究Qu墩河n的功能奠定基础。 本研究首先制备细胞样品，完成芯片杂交实验。随后应用多种数据分析方法， 对芯片结果进行分析，筛选出78种显著变化的基因，并通过RT．PCR和Real—time PCR验证了其中部分基因，证实了芯片结果的可靠性。进一步对芯片结果进行了 参与了细胞内的多种生理／病理活动，特别是对肿瘤细胞增殖、迁移、侵润等多 种通路都具有潜在的调节作用。 研究结果为深入探索Gankyrin的功能机制，尤其是Gallk如n在肿瘤细胞信号 转导调控中的作用提供了依据和线索。 关键词：Gankyrin表达谱芯片差异基因 Abstract discovered Gankyrin isan oncoprotein．Stmc觚any，human Gankyrinrecently acids 33一锄ino acidsaJldis ofseVen ankym 226锄ino comains composed protein ofme19S ofthe26S isa subunit regulatoryparticle non．catalytic repeats．Gankyrin wimtheS6bATPase andcombincs specially． proteasome fo啪d in was HCC(hepatoma me levelof higher InitiaUyexpressionGankyrin of cells．Since Gankyrin innonn2Ll tllen，me缸1ction carcinomacells)than hepatoma