二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达影响.pdfVIP

中文摘要 二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠 肾脏细胞凋亡及Fas和Fas．L表达的影响 摘 要 目的：探讨二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠肾脏保护机 制。糖尿病肾病(diabetic 见的微血管并发症之一。有资料表明西方国家2型糖尿病患 者DN的发生率为30％～50％，在我国约有21．5％。目前 DN已跃升为终末期肾病的首位原因，占35％左右。迄今为 止，单纯的中药或贝那普利尚不能有效地阻止DN对肾功能 损害的自然进程。因此，进一步探讨DN的发病机制，寻求 新的防治途径，已成为当前研究的热点之一。 DN的主要病理学特征为肾脏肥大，。肾小球基底膜 basement (glomemlar (tubularbasement 细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)进行性积聚，导 致结节性或弥漫性肾小球硬化。这种变化的组织学基础即是 ECM的积聚。随着分子生物学技术的进步，细胞凋亡 DN的发生机制，并导致。纾功能进一步恶化。研究发现，肾 脏细胞中存在Fas／Fas．L系统，并参与了糖尿病大鼠肾脏细 胞凋亡的调控。 我院肾病教研室采用益气扶正、活血通络、解毒降浊的 治疗原则，研创了二黄糖肾康(黄芪、大黄、茯苓、党参、 水蛭、鬼箭羽、怀牛膝、桑寄生等)治疗本病，取得了较好 中文摘要 的疗效。为深入探讨二黄糖肾康对糖尿病肾病肾脏保护作用 的机制，我们复制糖尿病肾病模型大鼠，通过观察二黄糖肾 康对糖尿病肾病模型大鼠的肾功能、细胞凋亡及相关蛋白 Fas／Fas．L表达等的影响，为临床治疗DN提供实验依据。 方法：选清洁级健康雄性SD大鼠60只，体重150．1709。 按Anderson等建立的方法随机抽取10只大鼠暴露肾脏后缝 合，为假手术组(SO)。其余50只大鼠行右肾切除术，2 周切口完全愈合后，按50mg／kg腹腔注射链尿佐菌素(STZ， 天后尾尖取血，测定血糖、尿糖和尿蛋白。血糖≥16．7mol／L， 尿糖阳性，尿蛋白(urinaryprotein，Upro)阳性，尿量大 于正常组150％者确定为模型。选40只成模大鼠，按空腹 血糖高低层次随机为模型组(M)、贝那酱利治疗组(B)、 二黄糖肾康低剂量组(L)、二黄糖肾康高剂量组(H)四组， 每组10只。上午B组、L组、H组均给予等量糖适平5mg／kg／d (相当于成人剂量的10倍)灌胃；下午B组给予贝那普利 1．7mg／kg／d(相当于成人剂量的10倍)灌胃，L组给二黄糖 肾康提取液189／kg／d(相当于成人剂量的10倍)灌胃，H 组给二黄糖肾康提取液369／kg／d(相当于成人剂量的20倍)， SO组和M组用等量蒸馏水灌胃。实验期间动物自由进食、 饮水，不使用胰岛素及其他降糖药物，本实验共8周。第8 周用代谢笼收集24小时尿，用于尿蛋A(urinaryprotein， Upro)测定；最后一次给药后，禁食8小时，称重，断头 取血，分离血清用全自动生化仪测定测空腹血糖(glucose， urea Glu)、尿素氮(blood 中文摘要 TUNEL法定量观察凋亡细胞；用流式细胞术测定肾组织细 胞凋亡率、细胞周期及Fas／Fas．L蛋白表达量。 结果：(1)Glu、INS检测：模型组比假手术组明显升 高(p0．01)；经药物干预后，治疗组均比模型组明显降低 (D0．01)；Glu，二黄糖肾康高、低剂量组与贝那普利组相 比，均明显降低(p0．05或p0．01)，二黄糖肾康高、低剂 量组组问有显著差异(p0．05)：INS，二黄糖肾康高、低剂 量组与贝那普利组相比，二黄糖肾康低剂量有降低趋势 糖肾康高、低剂量组间无显著差异(p0．05)。(2)BUN、 Scr、Upro检测：模型组比假手术组均明显升高(p0．01)； 治疗纰与模型组相比，均明显降低(P0．01)；二黄糖肾康 高剂量组与贝那普利组相比，有显著差异(P0．01或 与贝那普利组无显著差异(p0．05)；二黄糖肾康高剂量组 的BUN、Scr与二黄糖肾康低剂量组无显著差异(p0．05)； 二黄糖肾康高剂量组的Upro明显低于二黄糖肾康低剂量 法)细胞凋亡数日：肾小球内凋亡细胞数，