库普弗细胞缺血、缺氧和炎症反应相关基因与大鼠肝再生相关性及研究.pdfVIP

摘要 大鼠部分肝切除(partial 并可诱导缺血、缺氧等反应。而库普弗细胞作为肝脏内的巨噬细胞，在此时会分泌炎症 介质及细胞因子，通过其参与的信号通路来参与肝再生进行。为深入了解库普弗细胞上 述反应相关基因与大鼠肝再生的相关性，本文用percoll密度梯度离心和免疫磁珠方法分 Genome230 离大鼠再生肝库普弗细胞，用Rat 2．0芯片等方法检测其缺血、缺氧、炎症 反应相关基因在大鼠肝再生中表达变化，用生物学和系统生物学等方法分析上述基因与 大鼠肝再生的相关性。同时，用LYZ和ED2的抗体鉴定库普弗细胞。结果表明，分离 Genome230 的细胞纯度达96％以上；用RT-PCR和Rat2．0芯片检测库普弗细胞的持家 gapdh未发生有意义表达变化，4个功能基因的表达变化与芯片结果相似，表明芯片检 测结果可靠；用Western印迹方法检测各时点库普弗细胞的标志蛋白溶菌酶和13．肌动蛋 白表明，三者的含量均与对照时点相近，再生肝分离的库普弗细胞纯度均较高。 弗细胞的40、17、108个基因与缺血、缺氧、炎症反应相关。其中，起始表达上调和下 调的缺血、缺氧反应相关基因数分别为29