大豆脂肪氧合酶（LOX）的固定化及增强稳定性.pdfVIP

维普资讯 第21卷第6期 精 细 化 工 Vo1．21．No．6 2004年 6月 FINE CHEM ICALS June200 4 生物工程 大豆脂肪氧合酶 (LOX)的固定化及增强稳定性 蔡 琨，方 云 ，胡学铮，徐一铭，石玉刚 (江南大学 化学与材料工程学院，江苏 无锡 214036) 摘要：以活性白土、滑石粉为载体采用吸附法固定化大豆脂肪氧合酶(LOX)的优化条件为：(1)酶液对活性 白土 的用量 比为897U／mg，在浓度为0．05mol／L、pH=7．0的磷酸盐缓冲液中20qc搅拌吸附30min；(2)酶液对滑石 粉的用量比为238U／mg，在浓度为0．05mol／L、pH：8．0的磷酸盐缓冲液 中l0℃搅拌吸附 15min。经放大后实 验重复性良好。上述固定化酶置于0—4℃保存 20d，酶活损失分别为 19．2％和 17．7％；与游离酶相 比，能加快 酶促反应的速度并使产率分别提高9．6％和42．5％。以海藻酸钠为载体采用包埋法得到的固定化酶珠的耐热、 耐酸碱、耐有机溶剂能力较游离酶有很大提高，在妒(甘油)：75％的水溶液 中保存33d，酶活基本保持不变 ；在 50℃热处理60min后酶活仍能保持9o％。 关键词：脂肪氧合酶；固定化 ；稳定性；活性白土 ；滑石；海藻酸钠 中图分类号 ：Q814．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1003—5214(2004)06—0408—05 InnnobilizationofSoybeanLipoxygenasena dEnhna cementofStability CAIKun，FANG Yun ，HU Xue-zheng，XU Yi-ming，SHIYu—gang (SchoolofChemicalandMaterialEngineering，SouthernYangtzeUniversity，Wuxi214036，Jiangsu，China) Abstract：Theimmobilizationproceduresofsoybeanlipoxygenase(LOX)usingatlapulgiteortalcas carrierareoptimizedandscaledupwitharatioof897U／mgatlapulgitestirring30minina0．05mol／ LandpH 7．0 phosphatebuffersolutionat20 oC，andaratioof238U／mgtalcstirring 15min ina 0．05mol／LandpH 8．0phosphatebufferSOlutionat10 oC．Whenkeptat0～4 ℃ f0r20daysthe immobilizedenzymelosesactivityby19．2％ foratlapulgiteor17．7％ ofrtalc．Theimmobilizedenzyme leadsa9．6％ higheryieldofratlapulgiteor42．5％ hig【heryieldofrtalcinenzymaticreactionhtanthe freeLOX．Th eimmobilizedLOX beadsusingsodium alginateascarrieraremuchmorestablethanthe freeonewhenkeptatahighertemperature，inbroaderpH rangeandinorganicsolvents．Afterbeing keptinglycerol( (glycero1)=75％]for33days，thebeadsbarelyloseactivity．Thebeadsstill m