粟酒裂殖酵母中辅酶Q10的提取和测定方法.pdfVIP

维普资讯 遇 鐾 塑 一— — 粟酒裂殖酵母中辅酶Q。o的提取和测定方法 邱卫华 刘 萍 钟桂芳 孙君社 (中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京，100083) 摘 要 通过对高效液相色谱法测定辅酶Q10与紫外分光光度法测定辅酶Q10的比较，确定 了两者 之间的相关性，确定利用紫外分光光度法代替高效液相色谱法测定辅酶Q10，从而简化辅酶Qlo的 测定方法；通过对醇碱皂化法和碱皂化法提取辅酶Q10的比较，确定利用碱皂化法提取发酵液中的 辅酶Q。0，并进一步优化了碱皂化法的提取3_-艺。 关键词 辅酶Q10，测定，醇碱皂化法，碱皂化法 辅酶Q。又称泛醌、癸烯醌，它的化学结构 来很大困难。本文选用粟酒裂殖酵母生产辅酶 为6位碳上连有一个 10单位异戊二烯侧链的 Q 主要研究了发酵液中辅酶Q0的提取工艺 2。3一二甲氧基．5一甲基一1，4一苯醌衍生物…。以 和测定方法，为提高辅酶 Qo的产量、简化辅酶 极低的含量广泛存在于动物、植物、微生物等细 Q0的测定方法奠定了基础。 胞内，并能在所有的机体组织合成。辅酶Q0 在脏器(心脏、肝脏、肾脏)、牛肉豆油、沙丁鱼、 1 材料与方法 鲭鱼和花生等食物中含量相对较高，摄人0．45 1．1 菌 种 kg沙丁鱼、0．91 牛肉或 1．13kg花生可分别 粟酒 裂 殖 酵 母 S．promb 2．1794 提供约30mg的辅酶Q10L2J。辅酶Q10是一种 (Schizosaccharomycespromb)，购于中国科学院 脂溶性天然维生素类物质，在生物体内起递氢 微生物所。 体的作用 3【j，辅酶Q0作为细胞代谢的激活剂 1．2 培养基 和天然抗氧化剂在心血管疾病的治疗中起着重 斜面和种子培养基 (PYG培养基)(g／L)： 要作用，并可提高人体免疫力，所以广泛运用于 葡萄糖 10，酵母膏3．0，蛋 白胨 3．5，KH2PO4 治疗人体免疫系统疾病L4 J。因此辅酶Q0作 2．0，蒸馏水1L，自然pH。种子培养基中加入 为具有医学价值的重要生化药物、保健食品的 2％琼脂即为斜面培养基。 良好材料或化妆品的原料，越来越受到人们的 关注。 发酵培养基(g／L)：葡萄糖20，蔗糖20，酵 利用微生物发酵法生产辅酶 Q…具有原 母膏7．5，蛋白胨7．5，KH2P041．0，K2HP041． 料来源丰富、成本低、反应条件温和、易控制等 0，MgSO40．5，蒸馏水 1L，自然pH。 许多优点，可实现工业规模生产L8J。迄今为 1．3 酵母细胞壁破碎方法 止，国内外报道的辅酶Q】0生产菌株 卜9j主要 细胞培养到对数生长后期以6500r／min 为细菌如假单菌胞属、土壤杆菌属、红极毛杆 离心收集菌体，用蒸馏水洗涤2～3次后，蒸馏 菌、脱氮极毛杆菌、氢极毛杆菌等，还有象甲烷 水浸泡48h。称取一定量浸泡的酵母细胞，以 微环菌、脱氮副球菌、光合细菌等；其次是酵母 液固体积质量比2：1悬浮于pH7．4的磷酸钾 菌属如假丝酵母、尚德尔酒香酵母、隐球酵母 缓冲溶液中30min，加入0．15％的8一巯基乙醇