高磷、高钙诱导人血管平滑肌细胞钙化的研究.pdfVIP

第4O卷 第6期 贵 阳 医 学 院 学 报 Vo1．40 No．6 2015年6月 JOURNAL OFGUIYANG M EDICAL CoLLEGE 2015．6 -__ J 高磷 Cj 、同钙诱导人血管平滑肌细胞钙化的研究 傅碧玲，邹世海，彭 鑫，翁俊雄，邓柳霞 (深圳市宝安区人民医院 肾脏 内科，广东深圳 518101) [摘 要]目的：探讨高磷及高钙诱导血管平滑肌细胞发生钙化的分子机制。方法：以人血管平滑肌细胞 (VSMCs)为模型，采用不同钙磷浓度的培养基与细胞共培养 12d，将细胞分为正常钙、磷组 (对照组)、高磷组、 高钙组和高磷+高钙组，分别采用免疫印迹 (western—blot)技术、逆转录一聚合酶链反应 (RT—PCR)技术检测人 血管平滑肌细胞核心结合因子 01【(Cbfcd)、骨钙素、ft．一平滑肌肌动蛋白(-SMA)蛋白质和mRNA的表达；高磷 +高钙条件孵育下的细胞加入 ZVAD-FMK干预后 ，再次采用western-blot技术检测 Cbfcd、骨钙素蛋白质表达的 情况。结果：试验组Cbfod、骨钙素表达增强 (P=0．013；P=0．007)，而肌成纤维细胞的特异性标志物or．-SMA表 达下降(P=0．009)，对照组上述 3个指标无明显变化(P：0．055、P=0．074、P=0．63)；加入 ZVAD．FMK与高磷 +高钙组细胞共培养后，Cbfcd、骨钙素蛋白质的表达受到明显抑制。结论：高磷或 (和)高钙通过使血管平滑肌 细胞转化为成骨样细胞而导致钙化的发生；ZVAD—FMK可以在一定程度上抑制这一病理生理进程，提示凋亡和 成骨分化均参与了钙化过程。 [关键词]肌细胞，平滑肌；血管；高磷；高钙；核心结合因子 1(Cbfa1)；骨钙素；d．平滑肌肌动蛋白(．SMA) [中图分类号]R363．1 [文献标识码]A [文章编号]1000-2707(2015)06-0603-05 InfluenceofHighPhosphateandHighCalcium onCalcification ofHuman scularSmoothM uscleCells FUBiling，ZOU Shihai，PENGXin，WENG Junxiong，DENGLiuxia． (DepartmentofNephrology，thePeople~HospitalofBaoanDistrict，Shenzhen518101，Guangdong，China) [Abstract]Objective：Toinvestigatetheeffectandmolecularmechanismofhighphosphateandhigh calciumoncalcificationofhumanvascularsmoothmusclecells(VSMCs)．Methods：Thehuman VSMCswereco—culturedwithculturemedium ofdifferentdoseofphosphateandcalcium invitrofor12 daysandaccordingtodosageofcalcium andphosphatethecellsweredividedinto5groupsasfollows： normalcalciumandphosphategroup(controlgroup，P1．4mmol／L，Ca2．0mmol／L)，highphos— phategroup(P2．0mmol／L，Ca2．0mmol／L)，highcalciumgroup(P1．4mmol／L，Ca2．8mmol／ L)，highcalciumandhighphosphatergoup(P2．Ommol／L，Ca2．8mmot／L)．Western-blotandRT— PCRwereadoptedtodetecttheproteinandmRNA expression