《模式小鼠总DNA三种提取方法比较》.pdfVIP

2014年 7月 中国 比较医学杂志 July，2014 第24卷 第7期 CHINESEJOURNALOF C0MPARATIVE MEDICINE Vo1．24 No．7 模式小 鼠总 DNA三种提取方法 比较 刘廷苏，左 琴，周舒雅 ，王辰飞，贺争鸣，李保文，范昌发 (中国食品药品检定研究院，国家啮齿类实验动物种子 中心 ，北京 100050) 【摘要】 目的 建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法，以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方 法 采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取 同种模式小 鼠总 DNA，对比DNA纯度 、得率、耗费时间，并 比 较基 因型鉴定结果。结果 苯酚抽提法得率最高，异丙醇沉淀法最低 ；而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、 鼠耳煮沸法顺序递减 ；在耗时上 鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基 因型鉴定 。结论 鼠 耳煮沸法操作简单、成本最低 ，快速 、基因型鉴定结果可靠 ，可用于规模化 的基 因型鉴定实验 中。 【关键词】 总DNA提取方法；基因型鉴定；PCR反应；模式小鼠 【中图分类号】R332 【文献标识码】A 【文章编号】1671．7856(2014)07—0045—06 doi：10．3969．j．issn．1671．7856．2014．007．009 ComparisonofthreemethodsfortotalDNA extractionfrom mousemodels LIUSu—SU，ZUOQin，ZHOUShu·ya，WANGChen·fei，HEZheng—ming，LIBao—wen，FANChang—fa (LaboratoryAnimalResourceCenter，NationalInstituteofFoodandDrugControl， Beijing100050，China) A【bstract】 0bjective Toestablishasimple，fastandeconomictotalDNAextractionmethodtoservetherapid identification ofmodelmousegenotype in largenumber ofmice． M ethods Threemethods，i．e． phenolextraction， isopropylalcoholprecipitation andmouseearboilingmethodswereused to extractthetotalDNA from tenC57一rasmodel mice．ThepurityandyieldofDNA obtainedbythethreemethodswerecompared，andpolymerasechainreaction(PCR) assaywasusedtocomparetheefficacyofthethreeextractionmethods．ResultsAmongthethreemethods，phenolextraction wasthebestand isopropylalcoholprecipitationwasthepoorestin DNA yield． In termsofDNA purity，thephenol extractionwasthebestandthemouseearboilingmethodwasthepoorest．Allthethreemethodscouldbeusedtoextractthe totalDNA rfom mice servingastemplateofPCR reaction forthemousegenotypeidentification．Thet