《shRNA沉默DNA-PKcs表达对肝癌耐药细胞BEL74025-FU耐药性的影响》.pdfVIP

第37卷第3期 遵义医学院学报 V01．37NO．3 2014年6月 Journalof Medical Jun．2014 Zunyi University 基础医学研究 FU耐药性的影响 梁大敏，束 波，杨加伟，生 欣，范 芳 (遵义医学院生物化学教研室，贵州遵义563099) PCR及Western 细胞数计算转染率，Real—time blot检测沉默效率；MTT法检测细胞药物敏感性；Real—tittlePCR和Western blot检测P—gP tittle 序列。荧光细胞计数显示质粒的转染率为62．2％。RealPCR及Western blot检测结果显示DNA—PKcsmRNA及蛋白 time ADM、5一FU低(P0．05)，DDP和MMC的IC50值与对照组比无统计学意义(P0．05)。RealPCR和Westernblot检 测结果显示实验组P—gP BEL7402／5一Fu细胞中DNA—PKcs表达，增加细胞对化疗药物的敏感性，其机制可能与P—gP蛋白的下调有关。 [关键词]DNA依赖性蛋白激酶亚基；RNA干扰；BEL7402／5一FU；多药耐药；P一糖蛋白 [中图法分类号]R735．7[文献标志码]A [文章编号]1000-2715(2014)03-0304-04 EffectsofDNA—-PKcssilenceon resistanceof gene drug carcinomacelllineBEL7402／5一FU hepatoceUular LiangDamin，ShuBo，拖愕Jiawei，ShengXin，FanFang of Medical Guizhou 563099．China) (DepartmentBiochemistry，ZunyiUniversity，Zunyi To theeffectsofshDNA—PKcsDNA—PKcsOR resistanceof [Abstract]Objectiveinvestigate silencing drug the carcinomacelllineBEL7402／5一FU．MethodsshDNA—PKcswasiden— muhidrug—resistanthepatocellular tiffeddouble andthen transfectedintoBEL7402／5一FU by digestiontechnique．sequenceanalysis transiently cellsvia transfectionmethod．Thetransfectionwasevaluated the cathodolyteliposome efficiency bycalculating fluorescentcellsandthesilence was Real—timePCRandWestern efficiencyanalyzedusing