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医院感染与微生物标本的采集 微生物 胡立丛 医院感染监测包括了： 医院感染病例监测 消毒效果监测 环境卫生学监测 一、空气培养检测标准操作规程 1. 试剂：普通营养琼脂平板 2. 试剂有效期：3天（保存于2℃~8℃），即开即用。 3. 标本要求：采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。采样前应关好门窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。 4. 平板暴露法： 室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积＞30m2，设 4 角及中央 5 点，4 角的布点部位距墙壁 1m 处。将普通营养琼脂平板(直径为 9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面 1.5m 采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露 5min，盖好立即送检，37℃培养48小时，计算菌落数。 计算公式：细菌总数（cfu/m3）=50000N/（A T） 式中A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu） 5. 结果判定： Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3 (或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格； Ⅱ类区域：细菌总数≤200 cfu/m3 (或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格； Ⅲ类区域：细菌总数≤500 cfu/m3 (或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。 6. 密闭环境下低温（2℃~8℃）运输，8h内送检。禁止人为污染，破坏。 二、手消毒卫生检测标准操作规程 1. 试剂：含无菌洗脱液的棉拭子、普通营养琼脂平板 2. 试剂有效期：3天（保存于2℃~8℃），即开即用。 3. 标本要求：常规检测在洗手后从事诊疗操作前；特殊监测随时采样。 4. 操作流程：被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦面积约 30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 10ml 无菌生理盐水试管内，振打10次， 37℃培养48小时，计算菌落数 。 5. 结果判定：(消毒洗手) Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格; Ⅲ类区域工作人员：细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格; Ⅳ类区域工作人员：细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格; 6. 密闭环境下低温（2℃~8℃）运输，8h内送检。禁止人为污染，破坏。 三、物体表面检测标准操作规程 1. 试剂：灭菌后无菌生理盐水 2. 试剂有效期：3天（保存于2℃~8℃），即开即用。 3. 采集对象：包括台面、门、窗、门把手、金属、玻璃等曲面小型物体。 4. 采样时间：根据采样目的选择采样时间，如进行常规物体表面监测，选择消毒处理后进行采样。 5. 采样面积:常规监测时被采面积100 cm2,取全部表面；≧100 cm2，取100 cm2。 6. 对于平面的物体，用含无菌洗脱液的棉拭子1支，在被检物体横竖往返均匀涂抹各5次，并随之转动棉拭子，将棉拭子折去手接触部分，放入装有10ml的无菌洗脱液试管内，立即送检。 7. 对于门把手、金属、玻璃等曲面的小型物体则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样，放入装有10ml的无菌洗脱液试管内，立即送检。 8. 标本运输注意事项： 密闭环境下低温（2℃~8℃）运输，8h内送检。禁止人为污染，破坏。 四、污水总大肠菌群检测标准操作规程 1. 采样时间：在消毒后，排放前进行采样。 2. 采样方法:用灭菌容器取污水样1000ml，如果是经加氯处理的污水，需加1.5﹪硫代硫酸钠5 ml中和余氯。 3. 标本运输注意事项： 密闭环境下低温（2℃~8℃）运输，8h内送检。禁止人为污染，破坏。 二、微生物标本的采集及注意事项 （一）血液及骨髓标本的正确采集 1. 一般采血部位为肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静脉滴注药物处（或一手滴药，另一手采血）采集血标本； 2. 选择体温上升时采血可提高阳性率。对正在使用抗菌药物而又不能停药的患者，应在下次投入抗菌药物前采集标本。 3. 采集部位先以 70%酒精擦拭。再用棉签沾取2%碘酊涂于欲作穿刺处，让其干后再用70%酒精擦拭。 4. 全部手续再作一此（如必要）。 5. 采血量以培养液体积的 1/10 为宜,成人每次采血5-10ml,婴幼儿每次采血1-5ml; 6. 骨髓采集:严格消毒后抽取骨髓 0.5-1ml 7. 血液或骨髓抽出后过火，立即注入双相血培养瓶