去甲斑蝥素对人多发性骨髓瘤细胞株U266增殖及其凋亡的作用及机制研究.pdf

主塞垫墨 去甲斑蝥素对人多发性骨髓瘤细胞株U266增殖 及凋亡的作用及其机制的研究 摘 要 研究背景：随着社会老龄化的到来及诊断技术的提 高，多发性骨髓瘤在人群中的发病率呈现增长的趋势，且 发病趋向年轻化，所以多发性骨髓瘤的治疗越来越引起血 液学医生的重视。多发性骨髓瘤是来源于浆细胞系的血液 系统恶性肿瘤，主要表现为血液、免疫、骨骼及肾脏等方 面的改变，发病多为60岁以上的老年人，传统化疗的副作 用较大且缓解率低，病人耐受力较差，总生存期短。 目前，临床已将去甲斑蝥素(norcantharidin NCTD)广 泛应用于肝癌、食管癌等实体瘤化疗的辅助治疗，收到了 喜人的效果，也吸引了许多研究工作者对其抗肿瘤机制进 行深入细致的研究，并取得了相当不错的成果这些研究成果 ～方面为癌症治疗的临床用药提供了理论依据，另一方面也 拓展了对恶性肿瘤的治疗手段，斑蝥中的有效成分是斑蝥 素(can，cA)，可抑制细胞蛋白质的合成，影响细胞的生长分化， 但因其对泌尿系有强烈刺激作用，限制了其在临床的推广应 用，NCTD是将CA去除1，2位两个甲基合成而得，具有显著的 抗癌活性，其毒副作用较低，也是目前唯一具有升高白细胞作 用的抗肿瘤药物，对常见实体肿瘤：肝癌、食管癌、结直肠 癌、肺癌、胆囊癌、卵巢癌、黑色素瘤及血液系统肿瘤中． 的早幼粒细胞白血病、T淋巴细胞白血病等细胞的体内外生 长均有明显的抑制作用，实验表明：NCTD能在细胞毒作 主奎垫塞 用、诱导凋亡、抗粘附转移、抑制肿瘤血管生成等多个环 节发挥抗癌作用。 目的：研究NCTD对人多发性骨髓瘤细胞株U266的增 殖及其凋亡的影响及其作用机制。以期与化疗药同时应 用，达到减少并发症，提高疾病缓解率，增强病人耐受 力，延长病人的平台期，提高病人的总生存期。 方法：将不同剂量NCTD作用于人骨髓瘤细胞株 影响：1．不同剂量及时段NCTD作用后台盼蓝拒染率以明 NCTD的最佳剂量及最佳作用时间；2．倒置相差显微镜及光 镜下分别观察NCTD作用于U266细胞前后的细胞密度、形 胞前后细胞凋亡率及细胞周期来观察U266细胞株经NCTD 作用后是否发生凋亡以及凋亡的初步机制。4．通过RT． 测，进一步探讨NCTD诱导U266细胞株凋亡的机制。 结果： 及作用时间增加抗增殖作用增强，抑制率与药物剂量和作 u 用时间呈依赖性，在40mol／L，作用48h时作用达到顶 峰。 2．NCTD能够诱导人多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡， 光学显微镜下可见典型的凋亡改变：染色质边移、核皱 缩、核碎裂、核分解。流式细胞术测得细胞凋亡率随时间 剂量增加而增加，与对照组比较有显著性差异。 ． 生文摘要 一一 用后细胞发生G2／M期阻滞：且倒置相差显微镜下细胞显示 为哑铃型改变，提示细胞被阻滞在分裂期。 mRNA、蛋白表达均下调。 结论： 发生凋亡被阻滞在分裂期。 的表达有关。’ 关键词：去甲斑蝥素；多发性骨髓瘤；U266细胞系； Survivin；VEGF mechanismof The oftheeffectand study multiplemyeloma celllineU266 ABSTRACT rateof incidence Baekground：The multiplemyeloma