甘蓝型油菜BnMKS1基因的克隆、亚细胞定位及其诱导表达.pdfVIP

江苏农业学报 (Jiangsu ofAgr．Sci．)，2013，29(6)：1241～1247 http：／／www．jsnyxb．tom 1241 王 政，方和娣，陈 宇，等．甘蓝型油菜BnMKS1基因的克隆、亚细胞定位及其诱导表达[J]．江苏农业学报，2013，29(6)：1241—1427 doi：10．3969／j．issn．1O00444O．2013．06．010 甘蓝型油菜 BnMKS1基 因的克隆、亚细胞定位及其 诱导表达 王 政， 方和娣， 陈 宇， 李冠英， 谭小力 (江苏大学生命科学研究院，江苏 镇江 212013) 摘要 ：为了从油菜中克隆BnMKS1基因并且了解其诱导表达情况，以甘蓝型油菜品种中双9号为材料 ，采用 同源克隆法克隆获得甘蓝型油菜MKS1(BnMKS1)的cDNA序列。BnMKS1编码的蛋白质含有217个氨基酸残基， 与AtMKS1有82％的相似性。序列分析结果表明BnMKS1含有 1个VQ结构域和8个潜在的MAPkinase磷酸化位 点。农杆菌介导的烟草瞬时表达分析结果显示，BnMKS1是一个细胞核定位蛋白质。定量RT—PCR分析结果显示 ， 菌核病菌(核盘菌)、甲基茉莉酸以及苯丙噻重氮强烈诱导BnMKS1的表达，而脱落酸对其表达没有影响。说明 BnMKS1在油菜对菌核病菌Sclerotinia．sclerotiorum的防卫反应中起作用。这些结果将为进一步深入研究BnMKS1 在油菜与核盘菌相互作用中的功能提供有用的信息。 关键词： 油菜；BnMKS1基因；基因克隆；亚细胞定位 ；诱导表达 中图分类号： $565．4，Q78 文献标识码： A 文章编号： 1000-4440(2013)06—1241-07 Cloning，subcellularlocalization and induced expression ofBnMKS1 gene in oilseedrape WANG Zheng， FANG He-di， CHEN Yu， LIGuang-ying， TAN Xiao-li (InstituteofLfieSciences，JiangsuUniversity，Zhenjiang212013，China) Abstract： TocloneBnMKS1geneanddefineitsresponsetopathogeniccuesinoilseedrape，afulllengthcDNA of Brasswa．napusMKS1(BnMKS1)wasisolatedfromthelineZhongshuang9byhomology—basedcloning．BnMKS1isa 217．amino．acidproteinexhibitingan82％similaritywithAtMKS1．SequenceanalysisshowedthatBnMKS1containsaVQ domainand8potentialMAPkinasephosphorylationsites．Agrobacterium—mediatedinfiltrationtransientassaysinNicotiana showedthatBnMKS1islocalizedinnuclei．QuantitativeRT-PCRanalysisrevealedthattheexpressionofBnMKS1was stronglyinducedbySclerotiniasclerotiorum，methyljasmonateandbenzothiadiazole．ABAdidnotaffecttheexpression．It wassuggestedthatBnMKS1playsaroleintheoilseedrapedefenseresponseagainstS．sclerotiorum．Theresuhswilloffer usefulinformationinfurtherin—depthfunctionalanalysisof 收稿 日期：2013-07-28