《咖啡酸苯乙酯对抗脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应的作用及其机制的研究-论文》.pdfVIP

咖啡酸苯 乙酯对抗脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应 的作用及其机制 的研究 王英红 ，曾克武 ，宁显玲 ，刘俊义。，马治中 (北京大学医学部，．基础医学院中西医结合学系；b．药学院天然药物化学系 药学院化学生物学系，北京 100191) 摘要 ：目的 探究咖啡酸苯乙酯对脂多糖诱导的小胶质细胞BV一2神经炎症反应的抑制作用及其潜在的作用机制。方法 采 用脂多糖 (1 g·mL )诱导小胶质细胞 BV一2活化 ，制作 炎症反应模型，利用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率 ，并用酶联免 疫法测定咖啡酸苯乙酯对炎症因子一氧化氮、白细胞介素一1B和 白细胞介素一6合成释放的影响。然后用蛋 白印迹法研究了咖 啡酸苯乙酯对炎症相关蛋 白(诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶一2、IKB以及 P—IKB)表达的作用。此外，进一步研究了咖啡酸苯 乙酯对炎症转录因子NF—KB核转位的作用。结果 咖啡酸苯乙酯与脂多糖(1Ixg·mL )同时作用于BV一2小胶质细胞，分别 于温箱中孵育24、8h收集上清液，检测一氧化氮、白细胞介素一1p、白细胞介素一6的释放量。结果显示，脂多糖 (1 g·mL ) 可以造成细胞损伤 ，增加炎症因子释放 ，咖啡酸苯乙酯则可以降低脂多糖诱导的小胶质细胞对一氧化氮、白细胞介素一lB和 白 细胞介素_6的释放，并可抑制诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶一2、P—IKB、P—NF—KB蛋 白的表达，还可以抑制NF—KB的核转位。 结论 上述研究说明，咖啡酸苯乙酯(5，10，20Ixmol·L )可以通过抑制炎性 因子的表达而减少对小胶质细胞的损伤，其抗 炎活性可能是通过抑制 NF—KB信号通路介导的炎症反应实现的。 关键词 ：小胶质细胞 ；神经炎症 ；咖啡酸苯 乙酯；抗炎；脂多糖 doi：10．11669／cpj．2014．18．006 中图分类号：R965 文献标志码：A 文章编号：1001—2494(2014)18—1599—06 InhibitoryEffectsofCaffeicAcidPhenethylEsteronInflammatoryResponsesofMicroglialCells(BV-2)In- ducedbyLipOp0lysaccharide WANGYing—hong。，ZENG Ke．wu ，NINGXian．1ing ，LIUJun—yi，MA Zhi—zhong (a．Dep。rtme，z￡ofIntegratio of ChineseandWesternMedicine，PreclinicalMedicineCollege；b．DepartmentofNaturalMedicines，SchoolofpharmaceuticalSciences；c． DepartmentofChemicalBiology，SchoolofPharmaceuticalSciences，PekingUniversityHealthScienceCenter，Bejiing100191，China) ABSTRACT：OBJECTIVE Toinvestigatetheinhibitoryeffectsofcaffeicacidphenethylester(CAPE)onLPS—inducedinflammato— ry responsesinBV一2mieroglialcellsanditsmechanism．METHODS ThemodelwasbuildbyBV一2microglialcellsinducedbyLPS (1Ixg·mL )，whichwasusedtoinspectthecellsurvivabilitybymeansofMTT，investigatetheeffectofCAPEonthereleaseofin— flammatoryfactorNO，IL一1B，IL一6byELISA，andtheexpressionofinflammation—relatedprotein (iNOS，COX一2，IKB，P—IKB，NF— KB，P—NF—KB)wereanalyzedbyusedofWesternBlot．Finally，theregulatoryeffectsofCAPEoninflammatorytranscriptionfactorNF— KB activationwereinspected．RESULTS CAPE andLPSaffectedonBV一2cells．whicharecollectedafterbeingincubatedat37℃ f0r24or8h，thentestthe