柴油机废气颗粒潜在致癌作用机制及其细胞毒性观察.pdfVIP

山东医药 2014年第54卷第 20期 柴油机废气颗粒潜在致癌作用机制 及其细胞毒性观察 周 芳 ，李素丽 ，贾文亮 ，康春生 ，张庆瑜 (1天津医科大学总医院，天津300052；2天津神经病研究所 神经肿瘤实验室) 摘要：目的 通过柴油机废气颗粒 (DEP)作用于正常支气管上皮细胞 (HBE)，从表皮生长耐受体 (EGFR)、磷 酸肌醇．3激酶 (PBK)、蛋白激酶B(AKT)的变化探讨柴油机颗粒潜在致癌机制及对细胞毒性影响。方法 将DEP 以0、50、100、200、400 g／mL加人待测HBE细胞中，用Westernblot检测EGFR表达量的变化 ，从中选择对HBE细 胞影响最大的浓度作为研究对象实验组。Westernblot检测 DEP处理后实验组及空白对照组 HBE细胞内EGFR、 PI3K、AKT及 P．AKT的变化。DEP对细胞毒性的检测 ，通过 Transwell实验检测细胞侵袭能力，流式细胞术检测细 胞周期和凋亡变化。结果 加入浓度为 100xIg／mL的DEP处理后 ，HBE细胞中EGFR表达量明显高于其他浓度组 (P均 0．05)；Westernblot表明，实验组HBE细胞 PI3K、AKT及p-AKT的表达量较空白对照组显著上升(P均 0．05)，细胞毒性结果显示 ，与空白对照组 比较 ，实验组 HBE细胞周期阻滞于 Go／G。期 (P0．01)，凋亡率增加 (P 0．01)，侵袭能力下降。结论 DEP存在确切的细胞毒性，EGFR表达增加可能在DEP导致肺癌变的过程中起到 重要作用，其作用机制可能与激活下游PI3K／AKT通路有关。 关键词：柴油机废气颗粒；人正常支气管上皮；细胞表皮生长因子受体；细胞毒性 doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．20．002 中图分类号 ：R734．2 文献标志码 ：A 文章编号 ：1002-266X(2014)20-0005-04 Potentialmechanism ofcarcinOgenesisandcytotoxicityofdieselexhaustparticles ZHOU ， ．su一比，肚l耽n—liang，KANGChun—sheng，ZHANGQing—yu (1GeneralHospitalofTianfinMedical e ，Tianjin300052，China) Abstract：Objective Toinvestigatethepotentialmechanismofcarcinogenesisandcytotoxicityofdieselexhaustpra- ticles(DEP)byobservingthechangesofepidermalgrowthfactorreceptor(EGFR)，PBKandAKTwhenweaddedDEP intothenormalhumanbronchialepithelial(HBE)cells．Methods DEPof0，50，100，200nad400 g／mlwasadded respectivelyintothestudiedHBE cells，andtheexpressionchangeofEGFRwasdetectedbyWestern blottingandthenwe chosethemostobviousstimulatingconcentrationasthereserachobject．TheexpressionchangesofEGFR，PBK，AKTand p-AKTweredetectedby． Western blotting．Th etoxicitychangesofHBE cellswereobserved，thecell invasionabilitywas detectedbyTranswell，andhtecellcycleandapoptosisbyflow cytometry．Results Th eexpressionofEGFRinHBEcells whentreatedwith100 g／mlDEPwassignificnatlyhigherthanthatinotherconcentrations(P0．05)．Westernblotting showedthattheexpressionofPI3