碱性脂肪酶高产菌株Serratia+sp.SL-11的筛选及酶的分离纯化与部分性质研究.pdfVIP

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摘要 碱性脂肪酶高产菌 Serratia 1的筛选 sp.SL-1 及酶的分离纯化与部分性质研究 生物化学与分子生物学专业硕士研究生李长春 指导教师唐云明教授 (摘要) 从重庆市北碚区附近汽修厂、火车站、油脂厂等地方采集163份土样、油样,筛选得到一株高 产脂肪酶的野生细菌,命名为sL一11.根据茁体形态的显微观察和16SrDNA序列分析,经初步鉴定 表明,该菌株为沙雷氏菌属(Serratia)。 对产酶发酵条件进行了优化,确定最佳培养基组成为:黄豆饼粉4.096;蔗糖0.5%:橄榄油I.o%: K2HPO.0.2%;NaH:POt0.1%:MgS04·7H200.1%:TweenSO 0.5%,pH8.0。最佳摇瓶培养条件为:温度 32℃,转速为200r/min,优化条件后产酶量可达到优化前的2—3倍,经5代培养,该菌株产酶能力稳 定。 6690 67年【I 15U/mg、5770.50U/mg;最终被纯化了4035.08倍:回收率分别为20.9%、3.3%.经电 泳检测均达到了电泳纯。 通过对两种同工酶的部分酶学性质的研究,发现其中SLP—l最适pH为9.0,最适温度为50。C, fq,发现这两种酶对金属离子均很敏感,Mn“、Ga”、M92+对其酶活性具有强烈的激活作用,摄高可 使酶活提高14倍,仅Co“、Fe”对SLP一2活性具有一定的抑制作用。 开发前景。 关键词:脂肪酶沙雷氏菌属筛选纯化性质 Abstract the andcharacterizationof Screening,purification Serratia 1 producedby sp.SL一1 lipase Molecular and Biology Discipline:Biochemistry and Engineering Direction:EnzymologyEnzyme Yunming Supervisor:Prof.Tang MasterCandidate:Li Chang-Chun Abstract onbeibei.Itiside Astrainof bacteriumwasisolatedformsoil lipaseproducing andnamedasSerratia 1. —ntifiedasSerratia16srDNA analyse sp.SL一1 by sequence theSerratia 1 were

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