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米根霉发酵产l乳酸的中和剂研究及代谢通量分析
米根霉发酵产L．乳酸的中和剂研究及代谢通量分析
摘要
在米根霉发酵产L．乳酸过程中，一般采用CaC03作为酸中和剂，不仅L．
乳酸损失大，且环境污染严重。为降低L．乳酸生产成本，寻求替代CaC03的新
型中和剂，本文通过摇瓶发酵优化得出以CaC03、NaOH溶液和氨水作为中和
剂的最适培养基组成，通过罐发酵实验确定了CaC03、NaOH溶液和氨水的最
适中和剂浓度，并在最适浓度基础上考察了米根霉的菌体形态和发酵动力学，
实现了NaOH溶液和氨水作为中和剂的半连续发酵，同时对其进行代谢通量分
析。主要研究结论如下：
1．通过单因素和正交试验，优化得出采用CaC03、NaOH溶液和氨水作为
中和剂时的培养基组成：(1)以CaC03作为中和剂的最优培养基组成：葡萄糖
4．09／L，KH2P040．159／L，NaH2P04
1209／L，(NH4)2S04
O．229／L，MgS047H20
成：葡萄糖1209／L，(NH4)2S044．09／L，MgS04。7H20
O．229／L，’NaH2P040．109／L，KH2P040．159／L。(3)以氨水作为中和剂的最优培
养基组成：葡萄糖1209／L，(NH4)2S041．09／L，MgS04‘7H20O．359／L，ZnS04·7H20
0．159／L，KH2P04O．159／L。
0．229／L，NaH2P04
2．NaOH溶液和氨水作为中和剂时，添加Ca2+后L．乳酸产量平均提高7．3
倍；通过罐发酵得出米根霉发酵产L-乳酸的最适pH值为5．5士0．2，NaOH溶液、
氨水溶液作为中和剂的最佳浓度分别为10mol／L、25％，通过摇瓶发酵试验得出
为2．589／L、1．379／L、22．78
CaC03复合中和剂、氨水和CaC03复合中和剂时发酵强度皆为1．18
g／(L．h)，高
于NaOH溶液、氨水的发酵强度，低于CaC03的发酵强度。
3．在米根霉半连续发酵过程中，使用NaOH溶液作为中和剂时，L．乳酸平
均发酵强度为1．53g／(L．h)，以氨水作为中和剂时，L一乳酸平均发酵强度为1．65
g／(L．h1，高于分批发酵的产酸强度。
4．简单构建了米根霉As3．819胞内代谢网络模型。应用代谢通量分析法，分
流量速率分别是10．54mmol／g／h、4．72mmol／g／h、7．30mmol／g／h。
关键词：米根霉；L．乳酸：中和剂；半连续发酵；代谢通量分析
II
onneutralizersofL—-lacticacid
Study
andMetabolicFlux
byRhizopusoryzae
produced Analysis
Abstract
was usedasanacidneutralizerinthe
CaC03 of
commonly process
producing
L—lacticacid residuefromthe not
byRhizopusoryzae．CaS04 recoveryprocedure
causedthelossofL-lacticacid filtrationbutalso enormous
only
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