农杆菌介导东农冬麦1号成熟胚遗传转化体系的建立.pdf

目 录 摘j暮…………………………………………………………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要…………………………………………………………………………………………………III l前言……………………………………………………………………………………………………．．1 1．1小麦成熟胚的组织培养…………………………………………………………………………l 1．1．1基因型的选择…………………………………………………………………………………l 1．1．2小麦成熟胚培养基及接胚方式……………………………………………………………．1 1．1．3外源植物激素对成熟胚组织培养的影响…………………………………………………2 1．1．4添加物对成熟胚组织培养的影响…………………………………………………………．2 1．2小麦遗传转化的主要方法………………………………………………………………………．3 1．2．1基因枪法………………………………………………………………………………………3 1．2．2农杆菌介导法…………………………………………………………………………………3 1．2．3花粉管通道法…………………………………………………………………………………3 1．2．4其他转化方法…………………………………………………………………………………4 1．3农杆菌介导法在小麦遗传改良中的研究及应用……………………………………………．．4 1．3．1农杆菌介导法的转化机理…………………………………………………………………．．4 1．3．2农杆菌介导小麦遗传转化的发展历程……………………………………………………5 1．3．3影响农杆菌介导小麦遗传转化效率的因素………………………………………………6 1．3．4小麦遗传转化研究目前存在的问题与展望………………………………………………8 1．4本研究的目的和意义……………………………………………………………………………．9 2材料与方法……………………………………………………………………………………………10 2．1材料………………………………………………………………………………………………………………………………10 2．1．1植物材料……………………………………………………………………………………．10 2．1．2农杆菌菌株及质粒…………………………………………………………………………10 2．2仪器设备与试剂…………………………………………………………………………………10 2．2．1仪器设备……………………………………………………………………………………．10 l 2．2．2主要试验试剂………………………………………………………………………………．1 l 2．3方法………………………………………………………………………………………………………………………………1 1 2．3．1小麦成熟胚组织培养………………………………………………………………………1 2．3．2农杆菌转化…………………………………………………………………………………．13 2．3．3GUS基因组织化学检测……………………………………………………………………．14 2．3．4筛选及植株再生……………………………………………………………………………15 2．3．5转基因植株鉴定……………………………………………………………………………15 2．4数据记录与统计分析…………………………………………………………………………．．17