enzymologyc蛋白质浓度测定..pptVIP

7.在纯化过程中酶活力的损失主要原因：蛋白质变性 避免方法：改变温度和pH 其他原因：辅助因子被去除 第七节 蛋白质浓度的测定  凯氏定氮法 双缩脲法 福林（Folin)-酚试剂法 考马斯蓝染色法 紫外光吸收法 Determination of enzyme activity Enzyme activity （酶活力，酶活性） Active unit（酶的活力单位） Specific activity（酶的比活力） Enzyme activity 定义指酶催化一定化学反应的能力用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应速度（初速度）来表示 方法测定产物增加的量或底物减少的量eg. 化学滴定、比色、测定紫外吸收、荧光测定 Active unit （U） 国际单位1个酶活力单位，是指在特定条件下，在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量，或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。特定条件：温度—25oC 其他条件（eg. pH及底物浓度）均采用最适条件。 习惯用法eg. ?-淀粉酶，用每小时催化1g可溶性淀粉液化所需要的酶量来表示。 实例 ?-淀粉酶，?-淀粉酶 果胶酶 蛋白酶 脂酶 过氧化物酶 (POD) 多酚氧化酶 (PPO) 脂肪氧合酶  ?-淀粉酶活力测定方法碘显色能力下降的速度底物粘度下