多配体蛋白聚糖-1轴对肝癌细胞侵袭能力的影响.pdfVIP

第22卷第 1期 辽 东学院学报 (自然科学版) Vo1．22No． 1 2015年 3月 JournalofEasternLiaoningUniversity(NaturalScience) Mar．2015 【医药与卫生】 DOI：10．14168／j．issn．1673—4939．2015．01．11 乙酰肝素酶一1／多配体蛋白聚糖一1轴对肝癌细胞侵袭能力的影响 于生金 (辽东学院 医学院，辽宁 丹东 118003) 摘 要 ：乙酰肝素酶 一1(Heparanase一1，HPA一1)／多配体蛋 白聚糖 一1(Syndecan一1，SDC—1) 轴调控多种肿瘤细胞的转移。肿瘤细胞侵袭能力的改变是导致肿瘤脱离原发组织，进而向远隔器官转移的 关键启动因素。为了检测Heparanase一1／Syndecan一1轴在肝癌细胞 中是否存在及其对肝癌细胞侵袭能力 的影响，我们利用SDC一1小干扰 RNA及重组 HPA—l(rHPA一1)分别处理肝癌细胞Hepal一6，再通过 反转录PCR (RT—PCR)、Western—blot及免疫细胞化学检测SDC—l表达，应用体外基质胶侵袭实验观 察细胞侵袭能力的改变。结果显示：SDC—l小干扰 RNA明显抑制SDC—l表达；rHPA—l处理显著下调 SDC—l蛋 白的分子量，但没有改变SDC—l的mRNA表达 ；SDC—l表达下调及 rHPA一1处理均促进 He— pal一6细胞的侵袭。因此得 出结论：HPA—l通过作用于SDC一1蛋 白，即形成 Heparanase一1／Syndecan — l轴启动肝癌细胞转移。 关键词 ：乙酰肝素酶 一1；多配体蛋 白聚糖 一l；肝癌；侵袭 中图分类号：R735．7 文献标志码 ：A 文章编号：1673—4939 (2015)01—0048—06 恶性肿瘤的典型特征是肿瘤细胞不断突破微环 作用于SDC一1的HS侧链 ，即形成 Heparanase一 境中细胞外基质的束缚，在远隔器官形成转移瘤； 1／Syndecan一1轴促进癌细胞的增殖、侵袭以及血 肿瘤的转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因…。 管生成等恶性演进 ；针对 Heparanase一1／Syn— 原发性肝癌是我国最常见、恶性程度最高的肿瘤之 decan一1轴的抗肿瘤治疗也 日益得到重视。然而， 一 ， 手术切除仍是 目前治疗原发性肝癌的首选方 Heparanase一1／Syndecan一1促转移轴在肝癌中是 法。然而根治性切除后患者的5年复发率和转移率 否存在及其促转移机制尚不明确。本研究旨在探讨 仍居高不下，成为临床治疗的难题 。探寻肝癌细胞 HPA一1是否通过作用于 SDC一1的HS侧链介导 黏附因子与微环境的作用规律 、寻找有效的干预手 肝癌细胞的侵袭行为。 段将有可能为抗肝癌新药的开发以及临床治疗策略 1 材料与方法 的制定提供新的思路和方法。 多配体蛋白聚糖 一1(Syndecan一1，SDC一1) 1．1 细胞培养 是表达于细胞表面的黏附分子，以共价连接硫酸乙 肝癌细胞株Hepal一6购 自中国医学科学院细 酰肝素 (HS)侧链为主要结构特点 J。乙酰肝素 胞 中心。 酶 一1(Heparanase一1，HPA一1)是哺乳动物体 Hepal一6细胞使用含 10％胎牛血清的 DMEM 内的一种 B一内切糖苷酶，能特异性降解 SDC一1 培养基，在37。C、5％CO：的条件下培养。所有实 的HS侧链 j。已经发现HPA一1可在多种癌症 中 验均在细胞处于对数生长期进行。 收稿 日期 ：2012—11—25 基金项 目：辽东学院自然科学研究青年基金项 目 (2013q002)；辽东学院博士科